血清淀粉酶除来源于胰腺外,还来源于唾液腺及许多其他组织,所以在淀粉酶活性升高时,同工酶的测定有助于疾病的鉴别诊断。P-同工酶升高或降低时,说明可能有胰腺疾患;S-同工酶的变化可能是源于唾液腺或其他组织。当血清淀粉酶活性升高而又诊断不清时,应进一步测定同工酶以助鉴别诊断。有许多方法可以测定同工酶,琼酯糖和醋纤膜电泳法都是比较常用的方法。
淀粉酶的测定结果受方法的影响较大,不同方法参考值亦有所不同,临床所用方法也较多,因此必须了解所用测定方法和其参考值,才能作出正确的诊断。
作为胰腺疾病尤其是急性胰腺炎诊断的试验,淀粉酶测定应用已久,试验方法曾屡经改进,已经有过200多种方法。其试验基本原理都是把病人的标本(含淀粉酶)和作为底物的多糖一起进行反应后,测定反应后的剩余底物或产物来计算淀粉酶的医|学教育网搜集整理活性。很久以来一直以淀粉为底物,但由于淀粉来源物质不同,其分子结构、分子量变化都很大,因而会影响到淀粉酶的测定。多年的研究结果,认为从天然物质中提取的淀粉分子结构差异很大,不宜用做底物。现在已经改用限定性底物法,即选用结构明确,性质稳定医|学教育网搜集整理的小分子低聚糖作为底物,能产生稳定的限定性产物,然后测定反应产物(发色团或葡萄糖)量来计算淀粉酶活性。
用做限定性底物的一般有4~7个葡萄糖(戊糖、庚糖等),并连有发色团如β2-氯-4-硝基酚-G7、ethylidene-G7PNP等。试验中所用的工具酶α-葡糖苷酶来源不同时,其水解淀粉酶作用后产物的程度也不同,也会影响的测定结果。
很多阴离子有激活淀粉酶的作用,其中以Cl-,Br-为最强。血清甘油三酯浓度高时,可以抑制淀粉酶活性,应将标本加以稀释,以降低其影响。由于Ca2+是淀粉酶分子组成的部分,所以除肝素外,一般抗凝剂如草酸盐,枸橼酸盐等因能与Ca2+结合,抑制淀粉酶活性而不宜应用。
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