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胰蛋白酶的测定

2009-10-29 16:24 来源:
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  胰蛋白酶是胰腺分泌的重要消化酶之一,人类胰腺细胞合成两种主要的胰蛋白酶,通常是以无活性的酶原形式存在,即胰蛋白酶原-1和胰蛋白酶原-2,它们都储存在酶原颗粒中,在食道神经反射和/或肠道激素(胆囊收缩肽-肠促胰酶素)的刺激下分泌入肠道,肠液中的肠肽酶可以激活胰蛋白酶,胰蛋白酶本身及组织液亦可使其激活,亦可被Ca2+、Mg2+等离子激活。

  两种胰蛋白酶酶原的电泳迁移率不同,最适pH亦有差别,两者很少有免疫交叉反应,因此有可能用免疫方法医|学教育网搜集整理测定。

  1.血清胰蛋白酶:虽然胰液中含有大量的胰蛋白酶,正常时却很少进入血循环,健康人血清中存在的主要为游离胰蛋白酶原-l,没有游离的胰蛋白酶。

  急性胰腺炎时,血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高,其峰值可达参考值上限的2~400倍,两种胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的类型及严重程度有关。轻型者80%~99%为游离胰蛋白酶原-1及极少的结合型的胰蛋白酶-1;而重型者游离胰蛋白酶原-1可低到胰蛋白酶总量的30%,大部分以结合形式存在,它可以和α1-抗胰蛋白酶或α2-巨球蛋白结合。

  由于有上面所说的临床意义,许多人都想把血清胰蛋白酶测医|学教育网搜集整理定用于胰腺疾病诊断,但因为血清中还有其他蛋白酶也能水解试剂中的底物,同时还有蛋白酶的抑制物存在,这些都会影响测定结果,所以以前临床很少测定血清胰蛋白酶。但现在已经有了测定胰蛋白酶原-1、胰蛋白酶-1、胰蛋白酶-1:α1-抗胰蛋白酶复合物的免疫方法,不过目前还没有广泛用于临床。其临床意义和价值尚需观察和总结。

  2.尿胰蛋白酶:由于胰蛋白酶原的分子量比较小(25kd),所以很容易由肾小球滤出,但是肾小管对两者的回吸收却不同,对胰蛋白酶原-2的回吸收低于胰蛋白酶原-1,因此,尿中前者的浓度较大。在急性胰腺炎时尿中胰蛋白酶原-2的浓度明显升高。

  有研究报道急性胰腺炎时尿胰蛋白酶原-2的特异性为95%,敏感性为94%,说明其优于淀粉酶,是一个比较敏感而特异的诊断指标,而被用做在急诊时的筛选试验。尿胰蛋白酶原-2阴性结果多半可以除外急性胰腺炎,而阳性结果时应做进一步检查以确定诊断,也应做动态观察。

  现用的尿胰蛋白酶原-2的试纸条定性方法是基医|学教育网搜集整理于免疫层析的原理。试纸条上有两种抗人胰蛋白酶原-2抗体,一种标记于蓝色乳胶颗粒上,作为检测标记物,另一种固定在膜上,以捕捉标记的颗粒,显示阳性结果。按要求将试纸条的一部分浸入尿液,如果出现蓝色条带是为阳性。试验可以在床旁进行,于5分钟内完成,适合急诊应用。胰蛋白酶原-2还可用免疫荧光法作定量检测。

  急性胰腺炎的诊断要从两个方面考虑,即临床症状(急性腹痛等)和实验室检查(各项检查的临床意义已写在各试验中),但两者都有不典型的时候,应注意鉴别诊断。

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