从饮水中分离大肠杆菌的步骤如下： 

　　1.制作伊红美蓝培养基，趁热注入培养皿中，凝成平板，待用。

　　2.用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水，按1:10稀释医学教育|网搜集整理。

　　3.取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上。用平板划线分离法进行分离。

　　4.将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18～24小时。培养基中会出现大肠杆菌菌落，菌落中心呈暗蓝黑色，发金属光泽。

　　5.将菌落接种于斜面培养基上（由营养琼脂培养基制成）。