《微生物学及检验》重要考点（二）

1.常用的碱性染料有碱性复红、结晶紫、亚甲蓝等。

2.常用的酸性染料有伊红、刚果红等。

3.电离后显色离子带正电荷，易与带负电荷的被染物结合。由于细菌的等电点在pH2～5之间，在碱性、中性、弱酸性的环境中细菌均带负电荷，易与带正电荷的染料结合而着色。

4.培养基种类：

（1）基础培养基：含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基广泛用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。

（2）营养培养基：在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分，供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。

（3）鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。

（4）选择培养基：在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。

（5）特殊培养基：包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基，除含营养成分外，还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势，如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型，由于胞内渗透压较高，故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。

5.细菌的接种与分离技术：

（1）常用的平板划线分离法有以下两种：①连续划线分离法：此法主要用于杂菌不多的标本。②分区划线分离法：本法适用于杂菌量较多的标本。

（2）斜面接种法：该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。

（3）液体接种法：多用于一些液体生化试验管的接种。

（4）穿刺接种法：此法主要用于半固体培养基、明胶及双糖管的接种。

（5）倾注平板法：测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数时常用此方法。

（6）涂布接种法：常用于纸片法药物敏感性测定，也可用于被检标本中的细菌计数。

6.血琼脂平板上的溶血分类：

（1）α溶血：菌落周围血培养基变为绿色环状；红细胞外形完整无缺。

（2）β溶血：红细胞的溶解在菌落周围形成一个完全清晰透明的环。

（3）γ溶血：菌落周围的培养基没有变化；红细胞没有溶解或无缺损。

（4）双环：在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。

7.细菌的生物化学试验章节内容均需要掌握。

8.自动血培养检测系统的基本原理是检测细菌和真菌生长时所释放的二氧化碳（CO2）来作为血液中有无微生物存在的指标。

9.葡萄球菌：

（1）本属菌革兰染色阳性，形似葡萄串状。触酶试验阳性。

（2）抵抗力：对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。

（3）致病性：①食物中毒，急性胃肠炎；②烫伤样皮肤综合征；③中毒性休克综合征；④葡萄球菌性肠炎。

（4）金黄色葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阳性、甘露醇发酵试验阳性、对新生霉素敏感。

表皮葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素敏感。

腐生葡萄球菌：触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素耐药。

10.链球菌属：

（1）A群链球菌对杆菌肽敏感；B群链球菌CAMP试验阳性，可水解马尿酸钠；七叶苷试验阳性用于鉴定D群链球菌；α-溶血性链球菌对optochin耐药，不被胆汁溶解，不分解菊糖，可与肺炎链球菌相鉴别。

（2）根据链球菌在血平板上溶血情况分为三类：

1）甲型（α）溶血性链球菌：菌落呈灰色针尖状，菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，故又称草绿色链球菌。本菌为条件致病菌。

2）乙型（β）溶血性链球菌：通称溶血性链球菌，菌落较小，灰白色，菌落周围有2～4mm宽的透明溶血环。该型细菌致病性最强，常引起人和动物多种疾病。

3）丙型（γ）链球菌：呈灰白色细小菌落，在菌落周围无溶血环。一般无致病性。

（3）猩红热多由A群链球菌感染所致。草绿色链球菌常与亚急性心内膜炎相关。

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