检验士：《答疑周刊》2019年第22期：
《临床免疫学与检验》重要考点（二）
1.荧光免疫技术常用的荧光色素：
①异硫氰酸荧光素，呈现明亮的黄绿色荧光。②四乙基罗丹明，呈橘红色荧光。③四甲基异硫氰酸罗丹明，呈橙红色荧光。④藻红蛋白，呈明亮的橙色荧光。
2.时间分辨荧光免疫测定中多用Eu3+和Tb3+为标记物，其中Eu3+最为常用。
3.辣根过氧化物酶（HRP）是目前在酶联免疫吸附试验中应用最广泛的标记用酶。
4.邻苯二胺（OPD）被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。
5.四甲基联苯胺（TMB）：TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。
6.吖啶酯是目前常用的直接标记发光剂。
7.辣根过氧化物酶催化的发光剂为鲁米诺及其衍生物，碱性磷酸酶催化的发光底物为AMPPD。
8.每个亲和素能结合4个分子的生物素，二者之间的亲和力极强。
9.免疫组化最常用的制片方法有冷冻和石蜡切片。首选的制片方法是冷冻切片。
10.外周血单个核细胞的分离：Ficoll分离液可作为常规的淋巴细胞分离液，主要用于分离外周血中单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法，其分布由上到下依次为：稀释的血浆层、单个核细胞层、粒细胞层和红细胞层。
11.T细胞表面标志：CD3+CD4+CD8-辅助性T细胞；CD3+CD4－CD8+细胞毒性T细胞；CD4+CD25+调节性T细胞。
12.T细胞表面主要的CD抗原：
①CD2表达于全部人T细胞和NK细胞表面，因其能与绵羊红细胞结合，又称为绵羊红细胞受体。
②CD3是一种多链的糖蛋白，表达于全部T细胞表面，是T细胞的表面标志，是TCR-CD3复合物的重要组成部分。
③CD4/CD8：CD4和CD8分子分别表达于外周血不同的T细胞亚群表面，是区分T细胞亚群的重要标志。表达CD4的主要是辅助性T细胞，表达CD8的主要是细胞毒性T细胞。
13.膜免疫球蛋白（mIg）又称为BCR，表达于所有成熟的B细胞和大多数B细胞瘤的细胞表面，属于免疫球蛋白超家族原型，是B细胞最具特性的表面标志。
14.NK细胞的表面标志：目前NK标志以CD3-、CD16+、CD56+为公认。
15.T细胞功能检测：T细胞增殖试验、T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验和体内试验（特异性抗原皮肤试验和PHA皮肤试验）。
16.B细胞功能检测：B细胞增殖试验和溶血空斑试验。
17.溶血空斑试验：每一个空斑中央含一个抗体形成细胞，空斑数目即为抗体形成细胞数。空斑大小表示抗体形成细胞产生抗体的多少。
18.中性粒细胞功能检测：趋化功能检测、吞噬和杀菌功能测定（NBT还原试验）。
19.巨噬细胞功能检测：炭粒廓清试验、吞噬功能检测、巨噬细胞溶酶体酶的测定、细胞毒作用测定和巨噬细胞促凝血活性测定。
20.前向散射光（FS）：信号的强弱与细胞的体积成正比，因此可以说FS是用于检测细胞或其他粒子物体的表面属性。
21.侧向散射光（SS）：SS信号的强弱与细胞或其他颗粒形状及粒度成正比。SS用于检测细胞内部结构属性，可获得有关细胞内超微结构和颗粒性质的参数。
22.正常人尿液中Ig含量甚微。在滤过膜损伤轻微时，尿液中以IgG滤出增多为主，当滤过膜损伤严重时，尿液中除IgG滤出外，分子量较大的IgM也开始滤出。
23.免疫固定电泳是临床鉴定M蛋白最常用的方法。
24.正常血清中补体各组分含量相差较大，其中C3含量最高。
25.HBsAg为乙肝患者血清中首先出现的病毒标志物。
26.抗-HBs是一种保护性抗体，是机体感染或接种乙肝疫苗的标志。
27.HBeAg阳性是乙肝传染性的标志，在急性乙型肝炎早期常有HBeAg的检出。
28.超敏反应的分型：Ⅰ型超敏反应，即速发型超敏反应；Ⅱ型超敏反应，即细胞毒型或细胞溶解型超敏反应；Ⅲ型超敏反应，即免疫复合物型或血管炎型超敏反应；IV型超敏反应，即迟发型超敏反应。
29.Ⅰ型超敏反应的主要特征有：①超敏反应发生快，消退快；②常引起生理功能紊乱，较少发生严重的组织细胞损伤；③由特异性IgE型抗体介导，无补体参与；④具有明显的个体差异和遗传背景。
30.常见Ⅰ型超敏反应性疾病：①药物过敏性休克（青霉素引发的过敏性休克最为常见）；②血清过敏性休克；③呼吸道过敏反应；④消化道过敏反应；⑤皮肤过敏反应（可由药物、食物、油漆、肠道寄生虫或冷热刺激等引起。病变以皮疹为主，特点是剧烈瘙痒。）
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