一、药剂卫生标准

　　药剂作为直接应用于人体的特殊商品对卫生学有着较高的要求。药剂被微生物污染，可能会使其变质、腐败，甚至失效；也有可能危害人体。因此，各国GMP对药品卫生都做了严格规定，以保证药品能安全、有效地应用于临床。

　　（一）中药药品卫生标准

　　1.致病菌与活螨

　　口服药品每克或每毫升不得检出大肠杆菌，含动物药及脏器的药品同时不得检出沙门菌。不得检出活螨。外用药品每克或每毫升不得检出绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌；阴道、创伤、溃疡用制剂不得检出破伤风杆菌。

　　2.细菌和霉菌

　　（1）口服固体制剂

　　①不含生药原粉的制剂每克含细菌数不得过1000个，霉菌数不得过l00个。

　　②含生药原粉的制剂每克含细菌数，片剂、颗粒剂不得超过1医学教育|网搜集整理万个，丸剂不得过5万个，每克含霉菌数不得过500个。全部生药粉末分装的硬胶囊剂，不得过5万个；散剂，不得过l万个。霉菌数均不得过500个。

　　（2）口服液体制剂 每毫升含细菌数、霉菌数和酵母菌数均不得过l00个。

　　（3）外用药品

　　①眼科用药每克或每毫升含细菌数不得过l00个，不得检出霉菌和酵母菌。

　　②阴道、创伤、溃疡用制剂，每克或每毫升含细菌数不得过l000个，霉菌数不得过l00个。

　　③用于完整表皮、黏膜的含药材原粉的制剂。每克含细菌数不得过5万个，霉菌数不得过500个。

　　（4）气雾剂和膜剂

　　①膜剂细菌数及霉菌数每lOcm2不得过100个。

　　②气雾剂每毫升细菌数及霉菌数不得过100个。

　　（5）暂不进行限度要求的药品

　　①不含药材原粉的膏剂，如狗皮膏、拔毒膏等。

　　②含豆豉、神曲等发酵类药材原粉的中药制剂。

　　（二）中药制药过程的污染途径

　　1.原料药材

　　主要指植物类和动物类药材，直接携带多种微生物和螨，且很多药材（如含糖量较高的根茎类药材和脂肪较多的动物类药材）有利于微生物和螨的生长繁殖。

　　2.辅料

　　如水、蜂蜜、淀粉等常用辅料均存在一定数量的微生物。

　　3.制药设备

　　如粉碎机、混合机、制丸机、压片机及各种盛装物料的料桶和器具等均有可能带入微生物。

　　4.环境空气

　　空气中有多种微生物存在。

　　5.操作人员

　　工人的手、外表皮肤、毛发及穿戴的鞋、帽和衣服上都带有微生物。

　　6.包装材料

　　玻璃瓶、塑料袋、包装纸等可能带入微生物。

　　二、制药环境的卫生管理

　　我国GMP对药品生产企业所处环境的空气、场地、水质等卫生条件均有严格要求。

　　由于空气中的细菌多附着于5μm以上的尘粒上，因此制药车间净化空气除去尘粒，也就可有效地除去微生物。

　　（一）洁净室的等级及适用范围

　　关于洁净室的等级标准与要求见下表：

　　洁净室标准（1998年修订）：

　　制药厂的生产车间，根据洁净度的不同，可分为控制区和洁净区。控制区一般要求达到10万级标准，而洁净区要求达到1万级或100级标准。

　　（二）空气洁净技术与应用

　　空气洁净技术是指能创造洁净空气环境的各种技术。大气中悬浮着大量的灰尘，纤维、毛发、花粉、细菌、孢子等微粒。中药制药生产场所采取空气洁净技术，可有效地控制空气中的尘粒浓度，降低细菌的污染。目前，常用的空气洁净技术为层流洁净技术，它的气流动形式为层流。根据气流方向分为水平层流洁净室和垂直层流洁净室。

　　（三）不同净化级别的适用范围

　　100级洁净区适用于：①不能在最后容器中灭菌的无菌制剂的配液与灌封；②能在最后容器中灭菌的大体积（＞50ml时）注射用药品的滤过、灌封；粉针剂的分装、压塞；无菌制剂、粉针剂原料药的精制、烘干、分装。

　　1万级洁净区适用于：①需除菌滤过但不能在最后容器中灭菌的无菌制剂的配液；②能在最后容器中灭菌的大体积注射用药品的配液及小体积（＜50ml）注射用药品的配液、滤过、灌封；③滴眼液的配液、滤过、灌封；④不能热压灭菌的口服液的配液、滤过、灌封；⑤不能在最后容器中灭菌的油膏、霜膏、悬浮液、乳化液等药剂的制备和灌封；⑥注射用药品原料药的精制、烘干、分装。

　　10万级的控制区一般适用于；①片剂、胶囊剂、丸剂及其他制剂的生产；②口服和外用原料药的精制、烘干、分装。

　　三、灭菌方法与无菌操作

　　灭菌法是指杀死或除去所有微生物及其芽孢的方法。

　　与灭菌方法相关的操作包括：①灭菌：是指用物理或化学方法将所有致病菌和非致病的微生物、细菌的芽孢全部杀死的操作；②防腐（抑菌）：是指用物理或化学方法防止和抑制微生物生长繁殖的操作；③消毒：是指用物理或化学方法将病原微生物杀死的操作。

　　（一）物理灭菌法

　　物理灭菌法系指采用物理因素如温度、声波、辐射等达到灭菌目的的方法。加热可破坏微生物中的酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，是因为：①湿热灭菌时，有水分存在，蛋白质易变性；②湿热的穿透力比干热大；③湿热有潜热（汽化热）。

　　1.干热灭菌法

　　常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。

　　（1）火焰灭菌法 系指用火焰直接烧灼以达到灭菌的方法。将手术刀、镊子、药刀等通过火焰几秒钟即可。

　　（2）干热空气灭菌法 系指利用高温干热空气达到灭菌的方法。一般需160℃～170℃维持2h以上。本法适用于玻璃器皿、搪瓷容器及油性和惰性辅料，如液体石蜡、油类、脂肪类、滑石粉、活性炭等。

　　2.湿热灭菌法

　　本法是利用饱和水蒸气或沸水进行杀灭菌的方法。

　　（1）热压灭菌法本法系在热压灭菌器内，利用高压饱和水蒸气杀灭微生物的方法。该法是最可靠的灭菌方法。但灭菌应以保证药物不被破坏失效为前提，所以很多药剂不宜采用热压灭菌。热压灭菌法所需的温度及与温度相当的压力和时间，见下表。

　　常用的热压灭菌器有小型的手提式热压灭菌器、大型的卧式热压灭菌器等。热压灭菌法适用于耐热药物及其水溶液、手术器械及用具等物品的灭菌。热压灭菌器使用时应注意以下问题。①检查仪表：使用前应先检查压力表、温度表、安全阀等部件。②排尽空气：饱和水蒸气灭菌效力强于湿饱和蒸汽和过热蒸汽。为保证饱和蒸汽的获得，首先开启放气阀门将灭菌器内空气排尽，使压力与温度相符。③准确记时：一般先预热l5～20min，再升压和升温，达到预定压力和温度后开始计时。④灭菌完毕后，停止加热，待压力表指针降至零，打开放气阀，排尽器内蒸气，待温度降至40℃以下，再缓缓开启门盖。不可快速放气，骤然减压会导致容器爆裂和药液外溢。

　　（2）流通蒸气灭菌法和煮沸灭菌法 系指在常压下用100℃的水蒸气或用水煮沸以杀灭微生物的方法。灭菌时间一般为30～60min，可杀灭繁殖型细菌，但不一定能完全杀灭芽孢。适于含有抑菌剂药液的灭菌、1～2ml的注射剂及耐热品种的灭菌。

　　（3）低温间歇灭菌法 系指将待灭菌的物品先在60℃～80℃加热1h以杀死细菌繁殖体。然后再室温或孵箱保温24h，以使芽孢发育成繁殖体，再进行加热将其杀灭。如此操作三次以上，至全部灭菌。此法适于必须采用加热灭菌但又不耐高温的药品。应用本法灭菌的制剂，需添加适量的抑菌剂。

　　3.紫外线灭菌法

　　紫外灯产生紫外线，其中波长254～257nm的紫外线杀菌力最强。紫外线可使微生物核酸蛋白变性死亡，同时空气受紫外线辐射后产生微量臭氧也起灭菌作用。由于紫外线穿透能力很差，所以紫外线灭菌法仅适于表面和空气的灭菌。紫外线灭菌的适宜温度在10℃～55℃，相对湿度为45%～60%。

　　4.辐射灭菌法

　　辐射灭菌是应用γ射线杀灭细菌的方法。常用60Co辐射源放射γ射线杀菌，被灭菌物品温度仅有几度的变化，其灭菌的机理是γ射线直接作用于微生物的蛋白质、核酸和酶等，促使化学键断裂，杀死微生物；又可间接作用于微生物体内的水分子，引起水的电离和激发，生成自由基，再作用于微生物活性分子，使微生物死亡。由于γ射线穿透力极强，可用于密封和整箱已包装的药物的灭菌。灭菌效果可靠。一般认为中成药用l0千格瑞（KGY）以下剂量辐射均能达到卫生标准要求。

　　（二）滤过除菌法

　　滤过除菌法系指使药液通过除菌滤器中的适宜滤材，以物理阻留的方法滤除活的或死的细菌，以达到除菌目的方法。一般繁殖型微生物大小约l.0μm，芽孢约为0.5μm。一般滤材孔径须在0.2μm以下，才可有效地阻挡微生物及芽孢的通过。滤过除菌法适于不耐热的低黏度药物溶液，尤其是一些生化制剂。在除菌过程中，同时还可除去一些微粒杂质。本法必须配合无菌操作技术，成品必须经无菌检查合格后方可出厂。常用的滤器有垂熔玻璃滤器和微孔滤膜滤器。一般药液先经粗滤、精滤（砂滤棒，多孔聚乙烯、聚氯乙烯滤器，白陶土滤器，G4、G5垂熔玻璃滤器，0.45μm左右的微孔滤膜）后，在无菌环境下，再用已灭菌的G6垂熔玻璃滤器或0.22μm以下微孔滤膜滤除细菌。

　　（三）化学灭菌法

　　化学灭菌法系指用化学药品来杀灭微生物的方法。同一种化学药品在低浓度时呈现抑菌作用，而在高浓度时则能起杀菌作用。其杀菌机理可能是：能使微生物蛋白质变性死亡，或与酶系统结合影响代谢，或改变膜壁通透性使微生物死亡等。常用的方法有消毒剂消毒法和化学气体灭菌法等。

　　1.浸泡和表面消毒法

　　消毒是指杀死病原微生物的方法。但化学消毒剂大多仅能杀死微生物的繁殖体而不能杀死芽孢，能控制一定范围的无菌状态。可将消毒剂配成适宜浓度，采用喷淋、涂擦或浸泡等方法对物料、环境、器具等进行消毒。常用的化学消毒剂有0.1%～0.2%洁尔灭、新洁尔灭溶液、2%～5%的酚或煤酚皂溶液、75%乙醇等。常用于物体表面灭菌。但要注意其浓度不要过高，以防止化学腐蚀作用。

　　2.气体灭菌法

　　系指利用能形成气体或产生蒸气的化学药品达到灭菌目的的方法。

　　（1）环氧乙烷灭菌法 环氧乙烷室温下为气体，其分子作用于菌体后，能与菌体蛋白、核酸和酶中的-COOH、-NH2、-SH等基团起反应，而使菌体死亡。环氧乙烷分子易穿透塑料、纸板或固体粉末，因此可用于塑料包装的原料粉末、散剂、颗粒等固体药料及其他固体器具的灭菌。环氧乙烷具有可燃性，与空气混合时，当空气含量达3.O%（V／V）即可爆炸，应用时需用二氧化碳或氟里昂稀释。环氧乙烷对皮肤、眼、黏膜有损害，可产生水疱或结膜炎，应用时应注意防护。

　　（2）蒸气熏蒸灭菌法 采用甲醛、丙二醇或乳酸等化学品，通过加热产生蒸气进行空气环境灭菌。

　　（四）无菌操作法

　　系指药剂生产的整个过程均控制在无菌条件下进行的操作方法。某些药物若采用加热等方法灭菌则导致成分分解失效；为保证注射剂灭菌效果，避免污染，应采用无菌操作。无菌操作室应达到GMP的规定，为达到无菌要求可采取综合措施：①应采用层流洁净空气技术，大量无菌制剂生产在无菌洁净室内进行，小量无菌制剂的制备，采用层流洁净工作台；②用甲醛等蒸气熏蒸法消毒和紫外灯灭菌法进行空气环境灭菌；③室内用具、墙、桌等暴露面用消毒剂喷、擦消毒；④其他物品可热压或干热法灭菌；⑤操作人员衣、帽、鞋、手等应消毒及灭菌。

　　四、药剂的防腐与防腐剂

　　微生物有水分及其他适宜条件就可繁殖，即使像含较少水分的蜜丸，由于含较多蜂蜜，也易使霉菌繁殖超标。固体药剂所含水分较少，不利微生物繁殖，只要采用适宜灭菌方法就可达灭菌目的，而液体药剂则易被微生物污染，所以除采用适当方式灭菌外，可加防腐剂以抑制微生物繁殖。

　　防腐剂，又称抑菌剂，系指能抑制微生物生长繁殖的化学药品。

　　常用的防腐剂如下：

　　1.苯甲酸与苯甲酸钠

　　为常用的有效防腐剂，一般用量为0.01%～0.25%。苯甲酸水溶性较差，而苯甲酸钠水溶性好，易溶解，应用方便。但由于防腐机制是其分子型的苯甲酸透入菌体膜壁而起效，所以不论使用苯甲酸或苯甲酸钠，均宜在医学教育|网搜集整理pH4以下的药液中使用。使之绝大部分以分子型存在，故防腐效力较好。若pH值升高，则应加大用量。如pH＞5时用量不得少于0.5%。

　　2.对羟基苯甲酸酯类

　　对羟基苯甲酸酯类（尼泊金类）有甲、乙、丙、丁四种酯，抑霉菌作用较强，一般用量为0.01%～0.25%。在酸性、中性及弱碱性药液中均有效。但随着pH值的升高，在碱性药液中，由于酚羟基的解离及酯的水解而使尼泊金防腐力下降。聚山梨酯类与其发生络合作用，可减弱其防腐效力，应适当增加其用量。各种酯单用即可，几种酯合用有协同作用。由于酯类在水中溶解度较小，可先用热水将尼泊金搅拌使之溶解后加入；或取尼泊金先溶于少量乙醇中，再边加边搅，加入药液中。

　　3.山梨酸（钾）

　　常用浓度为0.15%～0.2%。对细菌和霉菌均有较强的抑菌效力。特别适用于含有聚山梨酯类液体药剂的防腐。

　　4.其他

　　20%以上的乙醇、30%以上的甘油也具有防腐作用，此外注射剂（肌肉或皮下注射用）中常加甲酚、苯甲醇等作抑菌剂用。