在手术过程中，虽然器械和物品都已灭菌、消毒，手术人员也已洗手、消毒，穿戴无菌手术衣和手套，手术区又已消毒和铺无菌布单，为手术提供了一个无菌操作环境。但是，还需要一定的无菌操作规则来保证已灭菌和消毒的物品或手术区域免受污染，手术进行中的无菌原则包括：

　　1.手术人员穿无菌手术衣后应避免受到污染，手术衣的无菌范围是腋前线颈部以下至腰部及手部至肘关节以上5cm。手术台边缘以下的布单均属有菌区域，不可用手接触。

　　2.手术人员及参观人员尽量减少在手术室内走动。

　　3.非洗手人员不可接触已消毒灭菌的物品。

　　4.洗手人员面对面，面向消毒的手术区域，只能接触已消毒的物品。

　　5.如怀疑消毒物品受到污染应重新消毒后再使用。

　　6.无菌布单如已被浸湿，应及时更换或盖上新的布单，否则可将细菌从有菌区域带到消毒物的表面。

　　7.不可在手术人员的背后传递器械及手术用品。

　　8.如手套破损或接触到有菌的地方，应另换无菌手套。前臂或肘部碰触有菌地方，应更换无菌手术衣或加套无菌袖套，污染范围极小的也可贴上无菌胶膜。

　　9.在手术过程中，同侧手术人员如需调换位置时，应先退后一步，转过身，背对背地转到另一位置。

　　10.作皮肤切口及缝合皮肤之前，需用70%酒精或2.5％～3％的碘酊涂擦消毒皮肤一次。切开空腔脏器之前，应先用纱布垫保护周围组织，以防止或减少污染。