方法名称：

小柴胡颗粒－黄芩苷的测定－高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量。

本方法适用于中成药小柴胡颗粒。

方法原理：

本品加70%乙醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长315nm处检测黄芩苷的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1. 70%乙醇

2. 甲醇

3. 磷酸

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 磷酸 =47 53 0.2

2.2检测波长：315nm

2.3柱温：室温

试样制备：

1. 称取供试品

取装量差异项下的本品，研细，取约3g或1.5g（无蔗糖），精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取黄芩苷对照品12mg，置100mL量瓶中，加70%乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置10mL量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，制成每1mL含黄芩苷60mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品，研细，取约3g或1.5g（无蔗糖），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，加70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长315nm处测定黄芩苷（C21H18O11）的峰面积，计算出其含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p357。