1. 吸收曲线的制作

用吸量管移取1.000 × 10-3 mol·L-1铁的标准溶液10.00 mL于50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入10%的盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，加0.15%邻二氮菲溶液2 mL，1 mol·L-1 NaAc溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上用 l cm 比色皿，以试剂空白为参比溶液，在440～560 nm 间，每隔10 nm测定一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长λmax。

2. 显色剂浓度的影响

取7只50 mL容量瓶，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的铁标准溶液2.00 mL和10%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，分别加入0.15%的邻二氮菲溶液0.10 mL，0.30 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，2.00 mL，4.00 mL，然后加入1 mol·L-1 NaAc溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用 l cm 比色皿，在最大吸收波长下，以试剂空白为参比溶液，测定以上七个溶液的吸光度。以邻二氮菲的体积 （mL） 为横座标，相应的吸光度为纵座标，绘制吸光度－显色剂用量曲线，找出在测定中应加人的显色剂的体积（mL）。

3. 有色溶液的稳定性

在50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1铁的标准溶液2.00 mL，10% 的盐酸羟胺溶液1 mL，0.15%的邻二氮菲溶液2 mL，l mol·L-1的NaAc溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。立即在所用波长下，用 l cm 比色皿，以相应的试剂空白为参比，测定吸光度，然后放置5 min，l0 min，30 min，1 h，2 h，3 h，测定其吸光度，以时间为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度－时间曲线，找出络合物稳定的时间范围。

4. 溶液酸度的影响

在9只50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的铁标准溶液2.00 mL，10%的盐酸羟胺溶液1 mL，0.15%的邻二氮菲溶液2 mL，再分别加入l mol·L-1的NaOH 溶液 0.00 mL，0.20 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL，2.50 mL，3.00 mL，以水稀释至刻度， 摇匀。用精密pH 试纸或pH 计测定各溶液的pH值。在所用波长下，用l cm 比色皿，以各自相应的试剂空白为参比，测定九个溶液的吸光度，以 pH 值为横座标，吸光度为纵座标，绘制吸光度－pH曲线，找出测定的适宜pH范围医\学教育网搜集整理。

5. 工作曲线的绘制

在6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的铁标准溶液0.00 mL，2.0 mL，4.0 mL，6.0 mL，8.0 mL，10.0 mL，再分别加入10%的盐酸羟胺溶液1 mL，0.15%的邻二氮菲溶液2 mL，1 mol·L-1 NaAc溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。在所用波长下，用l cm比色皿，以试剂空白为参比，测定各溶液吸光度，绘制工作曲线，并计算摩尔吸光系数。

6. 络合物组成的测定（摩尔比法）

取9只50 mL 容量瓶，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的铁标准溶液1.00 mL， 10%盐酸羟胺溶液1 mL，依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的邻二氮菲溶液1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL，2.50 mL，3.00 mL，3.50 mL，4.00 mL，4.50 mL，5.00 mL，然后各加入1 mol·L-1 NaAc 溶液5 mL，用水稀释至刻度，摇匀。在所用波长下用l cm比色皿，以各自试剂空白为参比，测定各溶液的吸光度，以吸光度为纵座标，以CR/CM为横座标，绘制曲线。根据曲线上前后两部份延长线的交点位置，确定反应的络合比。

7. 铁含量的测定

准确移取10.0mL未知液，按工作曲线的测定步骤，测定其吸光度，从工作曲线上求出未知液中Fe的含量（mg·mL-1）。

注：由于本实验所使用的邻二氮菲、盐酸羟胺、醋酸钠、NaOH 等溶液，均为无色透明的水溶液，所以实验中所有参比溶液，均可使用蒸馏水。