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免疫细胞计数

2016-05-26 14:21 医学教育网
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免疫细胞计数:

(一)荧光抗体染色

应用范围广泛,可分别使用于B细胞、T细胞及其亚类、MФ及NK细胞的计数及表面标记的测定,多选用间接荧光抗体染色,即活细胞与其特异性单抗作用后再与荧光抗球蛋白抗体反应,经荧光显微镜观察可见膜荧光。

(二)花环形成试验

T细胞与B细胞皆可应用该试验进行计数。计数T细胞的方法称E花环形成试验,即取外周血淋巴细胞与绵羊红细胞(SRBC)混合,在一定温度下作用一定时间,使SRBC与T细胞表面的E受体结合,医学|教育网搜集整理形成以T细胞为中心,绕有SRBC的花环样细胞集团。B细胞计数的方法有EA花环形成试验EAC花环形成试验,前者将红细胞(E)与相应抗体(A)结合成EA悬液,再与受试者的淋巴细胞混合,经制片染色后镜检,计数花环形成率;EAC花环试验仅在EA花环基础上加上补体,使先形成EAC,再与受试淋巴细胞混合。EA和EAC花环试验分别根据B细胞表面存在着FcγR和补体受体。主要应用于淋巴细胞的分离。

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