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溶液中的微粒受到光线照射后,微粒对光线产生反射和折射而形成散射光。
散射光强度与颗粒的分子量、数目、大小及入射光强度成正比,与微粒至检测器的距离、入射光波长成反比,因此使用高强度光源如激光、较短波长的入射光,可提高检测灵敏度。
当颗粒直径小于入射光波长的1/10时,散射光强度在各个方向的分布均匀一致,称为Rayleigh散射;
当颗粒直径大于入射光波长的1/10到接近入射光波长时,随着颗粒直径增大,向前散射光强于向后散射光,称为Debye散射;
当颗粒直径等于或大于入射光波长时,向前散射光远远大于向后散射光,称为Mile散射。
在免疫浊度测定中,可溶性抗原与相应抗体反应,生成的免疫复合物颗粒由小变大,而且免疫复合物颗粒的大小随抗原抗体的比例、浓度和分子大小而变化,相应地也会出现散射光强度随角度而变化的情况,因此,很难用固定的公式来计算散射光的强度,而是采取适当的角度测量散射光强度。
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