免疫诊断试剂使用注意事项

一．试剂准备

1）试验前将所需试剂盒组分在室温或37℃平衡30分钟；

2）试剂盒及其组分的保存按试剂盒操作说明书进行；

3）保存试剂盒的冰箱应经常检查储存温度并作好记录；

4）保存试剂盒的冰箱应避免频繁开关。

二．标本准备

1）抽血时，应尽量避免溶血；

2）非抗凝血自然凝固1-2小时后，3000rpm离心15分钟以制备血清标本；

3）用含有抗凝剂的采血管采血后，应立即颠倒混合5-10次并放置一段时间后，3000rpm离心15分钟以制备血浆标本；

4）标本若在五天内检测，应在2-8℃冰箱中保存，标本若需长期贮存，应于-20℃中密封保存，长期贮存的标本应为血清或血浆；

5）用于ELISA一步法检测的标本，不能使用NAN3防腐；

6）标本如需稀释，请用人血清或小牛血清稀释（说明书有指明的除外）。

三．加样

1）加样应严格按照试剂盒说明书中所规定的量和顺序进行；

2）加样时应将标本加在微孔反应板底部；

3）如不慎将样本或试剂溅出孔外时，应用吸水纸轻拭吸干，并做好记录；

4）手工操作时，微孔反应板加样后应及时温育；

5）标本加样过多时应分批操作，以免加样后温育前等待时间过长。

四．温育

1）测量温度应使用校准过的水银温度计；

2）温育容器的温度应恒定为37℃；

3）如果使用恒温箱温育时，除保证恒温箱内温度为37℃外，还应注意尽量少开启恒温箱门；温育时微孔板不要叠加；

4）微孔板不要置室温温育；

5）严格按试剂盒操作说明书控制温育时间，不能人为延长或缩短温育时间；

6）微孔反应板温育时要加贴封片，这样可以防止孔内液体成分蒸发或水珠等杂质滴入孔内影响检测结果；封片不能重复使用。

五．洗板

1）配置洗涤液需要新鲜、干净，且无细菌污染的蒸馏水或去离子水，洗涤液应现用现配；

2）盛放洗涤液的塑料容器应经常使用清洗剂彻底清洗，清洗干净后的容器方可使用；

3）洗板时应保证洗涤液注满微孔反应板的每个孔，洗完板后将微孔反应板在吸水板上轻轻拍干；

4）为保证洗板前洗板针的畅通，应经常用细针清除掉洗板针内积存的纤维蛋白等杂质；

5）使用洗板机洗板时，合理安排洗板时间和洗板间隔，避免因反应板过多造成洗板等待时间长；

6）微孔反应板洗板次数要保持一致，不能过多或过少；

7）如果微孔反应板需要拼接于板架上，必须确保板条放平，以免影响洗板机操作而造成洗板不彻底。

六．显色

1）OPD显色剂要在使用前配制，不能使用过期显色剂；请勿使用肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂；

2）添加显色剂时，注意不能溅出孔外；

3）显色剂应避免接触金属器械。

七．终止

加终止液应避免产生气泡，以免比色时结果不准确。

八．结果判读

1）酶标仪读数时，应保证微孔反应板底部清洁；

2）按说明书的规定进行读数和结果判读。

九。全过程

ELISA实验的整个操作过程中保证微孔反应板不接触次氯酸。