补体的检测及应用

Δ 补体Complement

是存在于人和动物血清中的一组具有酶活性的球蛋白，一般情况下处于未激活状态

Δ 补体的特性

稳定性差，各种理化因素都可使之失活：如酸、碱、紫外线照射、剧烈震荡等

实验室灭活补体的条件为：56℃30‘，室温2~3天也可自然失活

补体检测必须用新鲜血清

Δ 补体的组成

1.补体的固有成分：C1-C9，其中C1又包括C1q、C1r、C1s，共9种成分11种蛋白分子。其中C9的分子量最小、C3的含量最高

2.补体的调节蛋白：如C4调节蛋白、C1抑制物、S蛋白等

3.补体受体：如C1qR、C3aR等

Δ 补体的激活：三条途径

经典激活途径：又称C1途径

激活剂：IgG、IgM形成的AgAb复合物

参与成分：C1~C9

激活过程：这是一个连锁反应，缺少其中任何一个组分，连锁反应都不能进行下去

旁路激活途径：又称C3途径

激活剂：脂多糖、酵母多糖、IgG4和IgA的聚合物（提供接触表面）

参与成分：C3、C5~C9、B因子、D因子、P因子

甘露糖结合凝集素途径：又称MBL途径

在感染早期，常采用前两个途径，产生Ab后采用第一个途径

Δ 补体的生物学作用

溶菌、溶细胞作用（MAC效应）；调理作用（C3b、C4b和iC3b）；免疫黏附作用（C3b、C4b）；炎症介质作用：趋化作用（C3a，C5a）过敏毒素作用（C3a，C4a，C5a）

Δ 补体的检测

功能检测：总补体活性的检测、单一补体活性的检测（溶血试验）

量的检测：单一补体量的检测（免疫比浊法或单扩法）

Δ 溶血试验

SRBC+兔抗SRBC抗体（溶血素）+新鲜血清（提供补体）——启动经典激活途径（溶血）

指示系统：绵羊红细胞和溶血素

补体来源：多只豚鼠的混合血清

Δ 总补体活性检测：CH50试验

原理：组成和功能完整的补体系统能使致敏羊红细胞发生溶血；羊红细胞的溶血程度与补体的活性成正比

概念：在50%溶血附近（30%-70%之间），稍微改变补体量，溶血程度变化明显，因此以50%溶血率来判定终点较100%更为敏感

检测结果处理：最后找到与制备好的50%溶血标准管比较，取吸光度值最接近的一管，则CH50（U/ml）=1/血清用量X稀释倍数

总补体活性参考范围：50-100U/ml

Δ 单一补体活性的检测（溶血试验），常用于检测C3、C4、C1q、B因子等

Δ 单一补体量的测定：采用免疫比浊法或单扩法，常检测C3（含量1200~1300ug/ml）

Δ 补体检测的临床意义

1.补体量↑：多见于急性炎症感染、组织损伤、癌肿