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补体总活性测定是临床医学检验主任医师考试涉及的知识点,医学教育网搜集整理了相关资料以便大家更好地复习。
(一)补体总活性测定实验原理
补体最主要的活性是溶细胞作用。特异性抗体与红细胞结合后可激活补体,导致红细胞表面形成跨膜小孔,使胞外水分渗入,引起红细胞肿胀而发生溶血。补体溶血程度与补体的活性相关,但非直线关系。在一个适当的、稳定的反应系统中,溶血反应对补体的剂量依赖呈一特殊的S形曲线。如以溶血百分率为纵坐标,相应血清量为横坐标,可见在轻微溶血和接近完全溶血处,对补体量的变化不敏感。S形曲线在30%~70%之间最陡,几乎呈直线,补体量的少许变动,也会造成溶血程度的较大改变,即曲线此阶段对补体量的变化非常敏感。因此,实验常以50%溶血作为终点指标,它比100%溶血更为敏感,这一方法称为补体50%溶血实验即CH50. 考试用书
(二)检测试剂
绵羊红细胞;溶血素;稀释缓冲液。
(三)方法评价
CH50试验是测定经典途径总补体溶血活性,所反映的是补体9种成分的综合水平。方法简便、快速,但敏感性较低。补体的溶血活性除与试验中反应体积成反比外,还与反应所用缓冲液的pH、离子强度、钙镁浓度、绵羊红细胞数量和反应温度有一定关系。缓冲液pH和离子强度增高,补体活性下降,虽可稳定溶血系统,但过量则反而抑制溶血反应,故实验时对反应的各个环节应严加控制,统一步骤。
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