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方法名称: 诺氟沙星的测定—高效液相色谱法
应用范围: 该方法采用高效液相色谱法测定诺氟沙星(C16H18FN3O3)的含量。 该方法适用于诺氟沙星。
方法原理: 供试品制成流动相溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长278nm处检测诺氟沙星吸收值,计算出其含量。
试剂: 1.0.025mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节pH值至3.0±0.1) 2.乙腈 3.三乙胺
仪器设备: 1.仪器 1.1高效液相色谱仪 1.2色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按环丙沙星峰计算不低于2000,诺氟沙星峰与相邻杂质峰间的分离度应符合要求。 1.3紫外吸收检测器 2.色谱条件 2.1流动相:0.025mol/L磷酸溶液乙腈=8713. 2.2检测波长:278nm 2.3柱温:室温
试样制备: 1.称取供试品 精密称取该品25mg,置100mL量瓶中。 2.对照品溶液的制备 精密称取适量,加流动相溶液溶解并制成每1mL含25μg的溶液,摇匀,即得。 3.供试品溶液的制备 将供试品加0.1mol/L盐酸溶液2mL使溶解后,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取5mL,置50mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。 (注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。)
操作步骤: 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长278nm处测定环丙沙星的吸收值,计算出其含量。
参考文献: 中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,p.641.