小诺霉素能抑制细菌蛋白质的合成，同时有破坏细菌细胞壁的作用，抗菌谱与庆大霉素相似。对革兰阴性和阳性菌均有抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、沙雷杆菌、大肠杆菌等有较强的抗菌活性，对链球菌、肺炎球菌也敏感，但对厌氧菌及某些溶血性链球菌的作用较弱。特点是对氨基苷乙酰转移酶AAC（6｀）稳定，对产生该酶的耐药菌仍有抗团活性。特别是用于对敏感革兰阴性菌及耐药金黄色葡萄球菌等所致呼吸系、泌尿系、肠道、眼、耳、鼻、喉等感染，以及败血症、脓胸、骨髓炎、盆腔炎等。