对照品溶液的制备精密称取经80℃干燥至恒重的秦皮甲素对照品20mg,置10ml量瓶中,加乙醇适量,振摇使溶解,必要时可微温加热,放冷,加乙醇至刻度,摇匀,即得。 标准曲线的制备精密吸取对照品溶液30μl、50μl、70μl、90μl与110μl,照薄层色谱法(附录ⅥB)试验,沿硅胶G薄层板的起始线分别点成3~5cm的长条(据点样量的多少而定),以正丁醇-氯仿-甲苯-甲酸(8:1:1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视定位,分别刮取对照品条斑置具塞锥形瓶中。同时刮取同一薄层板下端与条斑等面积的硅胶G作为空白,置另一具塞锥形瓶中,各瓶均精密加入乙醇10ml,45℃水浴小心加热30分钟,放冷,滤过,取续滤液,照分光光度法,在336nm的波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
测定法取本品粉末(过三号筛)约1g,精密称定,置50ml具塞锥形瓶中,精密加入乙醇10ml,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验,精密吸取供试品溶液50μl,沿硅胶G薄层板的起始线点成5cm的长条,另精密吸取对照品溶液5μl,点于供试品条斑一侧间隔1.5cm处,作为对照。以正丁醇-氯仿-甲苯-甲酸(8:1:1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,刮取与对照品色谱中斑点相应位置上的供试品色谱中的条斑,照标准曲线的制备项下的方法,自“置具塞锥形瓶中”起,依法测定吸收度,从标准曲线上读出供试品溶液中秦皮甲素的重量,计算,即得。