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玉洁纯、硫酸锌对口腔主要致龋菌生长产酸的影响

2011-08-25 13:53 医学教育网
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  玉洁纯(triclosan),化学名三氯羟苯醚(2’,由于玉洁纯低毒性、低刺激性的特点,自80年代末90年代初被考虑用于口腔疾病的治疗。玉洁纯能有效地抑制菌斑的形成,并有抗炎、减少牙石沉积的多重作用,因此它较多地被考虑用于牙龈炎、牙周炎的防治。作为温和的非离子型抗菌剂,玉洁纯对致龋菌也应具有效的抑制作用,但有关这方面的报道较为少见。

  本研究采用体外细菌学实验方法观察不同浓度的玉洁纯和常与之配伍使用的硫酸锌对口腔主要致龋菌变形链球菌、远缘链球菌生长和产酸的抑制效果,确定抑制所需的浓度,为研制新型的防龋制剂提供理论依据医学教育网搜集整理。

  1材料与方法

  1.1制剂准备

  玉洁纯:〔汽巴精化(中国)有限公司提供〕,因玉洁纯难溶于水,因此先将其溶于丙二醇中,再用蒸馏水对半稀释加入培养基。硫酸锌:ZnSO4。7H2O(上海化学试剂总厂提供),溶于蒸馏水对半稀释加入培养基。

  1.2细菌培养

  选用国际参考菌株变形链球菌(SteptococcusmutansIngbritt,S.mIng)、远缘链球菌(Streptococcussobrinus6715,S.m6715)和变形链球菌、远缘链球菌的临床分离菌株各4株。临床分离菌株已经涂片镜检、生化鉴定、葡聚糖凝聚实验及DNAG+C定量测定鉴定为变形链球菌及远缘链球菌。冷冻保存的菌株活化后转种胰蛋白酶消化大豆培养基,微需氧,φ(N2)=90%,φ(CO2)=5%,37℃培养18h。

  1.3生长抑制实验

  实验药品:①玉洁纯原液质量浓度自0.005g/L连续对半稀释5次至0.00016g/L;②硫酸锌原液质量浓度自2.5g/L连续对半稀释5次至0.08g/L;③配伍药液:玉洁纯与硫酸锌质量浓度由低到高相对配伍。

  保存的细菌经活化后,取培养物于无菌离心管2500r/min离心,用生理盐水洗涤两次制成悬液,置紫外分光光度计调整菌浓度为吸光度值等于1(λ=450nm)。

  抑制组:用无菌微量加样器吸取不同浓度的药液各0.1ml,分别加入灭菌的4ml蛋白胨酵母葡萄糖培养基中,加样顺序由低浓度到高浓度;药液加毕后再在每试管中加入0.4ml菌液,振荡混匀,微需氧φ(N2)=90%、φ(CO2)=5%、37℃培养48h后取出。培养物经旋涡混合器混匀,通过紫外分光光度计测定吸光度值,并计算生长抑制率:

  阳性对照组:培养基中不加药液只加菌液。阴性对照:培养基中只加药液不加菌液。

  1.4产酸抑制实验

  在测定了各培养基细菌的生长抑制情况后,原培养基用酸度计(pH-3C型,上海雷磁仪器厂)测定培养液的pH值。

  2结果

  玉洁纯、硫酸锌以及它们的配伍对S.m、S.sob的国际参考菌株和临床分离菌株都有显著的抑制作用,抑制效果见图1~6。

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