1.标本采集:肠道感染可采集粪便;肠道外感染可根据临床感染情况采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。
2.检验方法及鉴定
(1)涂片与镜检:脓汁及增菌培养物发现单一革兰阴性杆菌,可初步报告染色、形态、性状供临床用药参考。
(2)分离培养:粪便标本可用弱选择鉴别培养基进行分离,脓汁等可用血平板分离,取可疑菌落进行形态观察及生化反应。
(3)鉴定
1)初步鉴定:根据菌落特征,涂片染色的菌形及染色反应,取纯培养物作生化反应。凡符合KIA:A/A或K/A、产气或不产气、H2S-;MIU:动力+或-、吲哚+、脲酶-;氧化酶-,IMViC:++--,可鉴定为大肠埃希菌医学|教育网搜集整理。
2)致病性大肠埃希菌:
EPEC的鉴定:
EIEC的鉴定:应与志贺菌相鉴别,两者的主要鉴别试验可用醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及粘质酸盐产酸三种试验。大肠埃希菌均为阳性,而志贺菌均为阴性。
ETEC毒素的检测:采用改良Elek法测定LT并采用乳鼠胃内灌注法检测ST.
EHEC的血清学鉴定:
EAEC的鉴定:检测细菌对HEP-2细胞或Hela细胞的粘附性。
肠道外感染,经涂片染色,分离培养后,生化鉴定到种;由于大肠埃希菌是超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要产酶株,该酶由质粒介导。对ESBLs产酶株所致感染需要采用碳青酶烯类或内酰胺类抗生素/酶抑制剂或头霉菌素类进行治疗。肠道内感染还需做血清分型、毒素测定或毒力试验。食物、饮料、水等卫生细菌学检查,主要进行大肠菌群指数检测。