SPA酶联免疫吸附试验的注意事项：

1.目前使用的聚苯乙烯塑料板对抗体的吸附性能较好，因此对于抗原，特别是大分子（分子量＞100万）的抗原应该进行一些适当的处理，如DNA，应将其事先冻融，使其变成较小分子再包被，如脂蛋白则应改变包被的温度，可在37℃包被过夜医`学教育网搜集整理。

2.由于SPA－ELISA的敏感性极高，因此也很容易出现非特异性显色，排除非特异性显色的方法除了纯化抗原抗体外，还应该注意：

（1）抗原包被后，再以牛血清白蛋白包被一次或稀释液中加入1%的牛血清白蛋白均可，以占据未包被的一些空隙。

（2）检测血清抗体时，需事先检测大标本量的正常血清效价水平，在检测待检标本时，减去正常的血清效价。

（3）ELISA法加入标记物后往往37℃孵育2h，SPA同IgG的结合不是免疫反应，而是一种化学反应，一般认为，这种结合可能在极短的时间内发生，所以加PPA后，孵育时间可以缩短到0.5h.孵育过久，反而可因为SPA本身吸附到反应板上，造成非特异性显色。

3.叠氮钠对SPA显色影响较大，所以在SPA-ELISA过程中，不宜加叠氮钠做防腐剂，在组织细胞培养固定，也不适宜用甲醛固定，而需采取甲醇或乙醇。