人参皂甙Re 对照品溶液的制备 精密称取人参皂甙Re对照品8mg,置5ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含人参皂甙Re 1.6mg)。标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0、20、40、60、80、100μl,分别置10ml具塞试管中,置水浴上挥去溶剂,立即取出,放冷,加5%香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml,摇匀,置60℃水浴中加热15分钟,取出,用水冷却2分钟,加冰醋酸5ml,摇匀,照分光光度法(附录Ⅴ B),在544nm波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标,绘制标准曲线。供试品溶液的制备 精密量取该品20ml,置分液漏斗中,用氯仿提取3次,每次20ml,合并氯仿提取液,用蒸馏水洗涤2次,每次5ml,弃去氯仿液,洗液与上述水层合并,置分液漏斗中,用水饱和的正丁醇提取3次,每次50ml,合并正丁醇提取液,加入无水硫酸钠3g,搅拌,放至澄清。将正丁醇液移至蒸发皿中,用少量正丁醇洗涤无水硫酸钠,洗液并入蒸发皿中,蒸干,用少量蒸馏水溶解残渣,加到大孔吸附树脂(DA-201)柱上,侍液面接近棉花层后,用蒸馏水100ml洗脱(控制流速为0.4ml/min),弃去洗液,用70%乙醇80ml 洗脱,收集洗脱液于蒸发皿中,置水浴上蒸干,用甲醇溶解残渣,移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
测定法 精密量取供试品溶液100μl,照标准曲线的制备项下的方法,自“置10ml具塞试管中”起依法测定吸收度。从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂甙Re的重量(μg),计算,即得。该品每支含人参以人参皂甙Re(C48H82O18)计,不得少于2.0mg。斑蝥素 照气相色谱法(附录Ⅵ E)测定。色谱条件与系统适用性试验 以聚乙二醇20M及甲基硅橡胶(SE-30)为固定液,涂布浓度分别为10%和5%,1:1混合装柱。柱温为180±10℃;理论板数按斑蝥素峰计算,应不低于1500。
对照品溶液的制备 取斑蝥素对照品适量,精密称定,加氯仿制成每1ml合0.1mg的溶液,作为对照品溶液。供试品溶液的制备 精密量取该品50ml,加入1.8mol/L硫酸溶液5ml,用氯仿振摇提取3次(50、30、30ml),合并氯仿液,用K-D浓缩器浓缩定容至5ml,即得。
测定法 分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各5μl,注入气相色谱仪,计算,即得。
该品每支含斑蝥素(C10H12O4)为0.008~0.030mg。