采用雌性激素对性器官增重法,选用雌性幼大鼠,分成给药组及对照组。定坤丹组以每公斤体重6000mg灌胃给药,空白对照组以赋形剂蜂蜜同体积(1ml)灌胃,阳性对照组以乙烯雌酚为参考标准,每只大鼠注射4mg,以0.2ml植物油溶解,隔日注射,共5次(10日)。停药后,第3日剖检,以各组动物子宫卵巢重量/100g体重,进行组间对比,定坤丹组子宫卵巢重量为161(mg/100g体重),空白对照组为131,已烯雌酚组为254,组间有非常显著的差异。证实定坤丹确有雌性激素样活性。镜检证实,能使大鼠子宫内膜增厚,细胞呈双层均匀排列。腺胞较多,体积比较大,距子宫内膜近,呈现腺体分泌状态。卵巢有初级、次级及成熟卵胞,按次序健壮发育。这为定坤丹治疗月经不调,性器官发育不良及不孕症等,提供了药理学依据。并证明定坤丹的作用,不象已烯雌酚那样强烈,说明中药复方的作用,有其缓和持久的突出优点。
大鼠离体子宫在定坤丹(1:5)0.5ml或1ml溶液中都不显示子宫平滑肌收缩,经在麦氏浴中作用5分钟再加入0.125u的垂体后叶素时,即呈现子宫平滑肌收缩现象,放出药液和营养液后洗净,再同时加入相同剂量的定坤丹(1:5)1ml及垂体后叶素0.125u也呈现子宫平滑肌收缩现象,但收缩距离则比前者差5mm。且见定坤丹作用时间较长,缓解子宫平滑肌的作用越明显。
采用化学物质刺激法,定坤丹组,试验前一小时灌胃给药,每20g小鼠给定坤丹0.3g。阿司匹林组为阳性对照,180mg/kg体重,灌胃给药。空白对照组5-10分钟之间阵痛212次,每只平均阵痛17.7次。阿司匹林组5-10分钟之间阵痛81次,每只平均阵痛8.1次。定坤丹组5-10分钟之间阵痛80次,每只平均阵痛8.0次。定坤丹抑制阵痛次数,达到对照组的50%,可见定坤丹有显著的镇痛作用。
定坤丹制成饲料块,按定坤丹4.8g/kg体重,给小鼠用药。对照组给不含药饲料块。连续用药7日,然后腹腔注射灭菌肉汤1ml,22小时后,再往小鼠腹腔注射鸡红细胞混悬液0.5ml/(5×106个),经40分钟后处死,取腹腔液涂片,染色,镜检判定吞噬率和吞噬指数。对照组吞噬率17.32±1.5%,吞噬指数1.44±0.15;定坤丹组吞噬率32.76±1.80%,吞噬指数1.50±0.15。两组间吞噬率的差别有高度显著性,即吞噬能力非常显著地增强。吞噬指数无显著意义。