方法名称：

百令胶囊－ 腺苷的测定－高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定百令胶囊中腺苷的含量。

本方法适用于中成药百令胶囊。

方法原理：

本品经超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长260nm处检测腺苷的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1. 乙腈

2 .0.04mol/L磷酸二氢钾溶液

3 .乙醚

4 .0.5%磷酸溶液

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按腺苷峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 0.05mol/L磷酸氢二钠溶液=17 83

2.2检测波长：260nm

2.3柱温：室温

试样制备：

1. 称取供试品

取装量差异项下的本品内容物，混匀，取约0.5g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取腺苷对照品适量，加0.5%磷酸溶液制成每1mL含腺苷12mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品内容物，混匀，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醚20mL，密塞，浸泡30分钟，滤过，密塞，弃去乙醚，残渣挥干，连同滤纸一并置具塞锥形瓶中，精密加入0.5%磷酸溶液50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用0.5%磷酸溶液补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长260nm处测定腺苷（C10H13N5O4）的峰面积，计算出其含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p434。