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肌苷片-测定方法

2012-11-07 20:27 医学教育网
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方法名称: 肌苷片-肌苷-高效液相色谱法

应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定肌苷片中肌苷的含量。

本方法适用于肌苷片。

方法原理: 供试品研细,加水定量稀释制成供试液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长248nm处检测肌苷的峰面积,计算出其含量。

试剂: 甲醇

仪器设备: 1.仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按肌苷峰计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2.色谱条件

2.1 流动相:甲醇 水=10 90

2.2 检测波长:248nm

2.3 柱温:室温

试样制备: 1. 对照品溶液的制备

精密称取肌苷对照品适量,加水溶解制成每1mL中约含20µg的溶液,即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取供试品10片(如为糖衣片,应除去包衣),精密称定,研细,精密称取适量(约相当于肌苷0.1g),置100mL量瓶中,加水约70mL,充分振摇使肌苷溶解,用水稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2mL,置100mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即为供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长248nm处测定肌苷(C10H12N4O5)的峰面积,计算出其含量。

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