方法名称: 健胃消食片- 橙皮苷的测定-高效液相色谱法
应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定健胃消食片中橙皮苷的含量。
本方法适用于中成药健胃消食片。
方法原理: 本品经甲醇加热回流,放冷,补重,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长283nm处检测橙皮苷的吸收值,计算出其含量。
试剂: 1. 甲醇
2. 0.5%冰醋酸溶液
仪器设备: 1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按橙皮苷峰计算应不低于2000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:甲醇 0.5%冰醋酸溶液=40 60
2.2检测波长:283nm
2.3柱温:室温
试样制备: 1. 称取供试品
取本品10片,研细,取约2g,精密称定,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取橙皮苷对照品12.5mg,置100mL量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取3mL,置25mL量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,制成每1mL含橙皮苷15mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
取本品10片,研细,取约2g,精密称定,精密加入甲醇20mL,称定重量,置水浴上加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液5mL,置10mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长283nm处测定橙皮苷(C28H34O15)的峰面积,计算出其含量。
参考文献: 中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p567。