方法名称：

桂附地黄丸－马钱苷的测定－高效液相色谱法

应用范围：

该方法采用高效液相色谱法测定桂附地黄丸中马钱苷的含量。

该方法适用于中成药桂附地黄丸。

方法原理：

该品经甲醇超声处理后，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长236nm处检测马钱苷的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1. 甲醇

2. 乙腈

3. 0.05%磷酸溶液

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按马钱苷计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈为流动相A，0.05%磷酸溶液为流动相B

时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%）

0~20         11           89

20~30         90         10

30~40          11         89

2.2检测波长：236nm

2.3柱温：30℃

试样制备：

1. 称取供试品

取该品水蜜丸，研碎，取约1g，精密称定；或取小蜜丸或重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取约1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取马钱苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含20mg溶液。

3. 供试品溶液的制备

供试品，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25mL（剩余的续滤液备用），蒸干，残渣用甲醇溶解，并转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长236nm处测定马钱苷（C17H26O10）的峰面积，计算出其含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p556。