方法名称：

注射用氢化可的松琥珀酸钠—氢化可的松琥珀酸钠的测定—高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定注射用氢化可的松琥珀酸钠中氢化可的松琥珀酸钠（C25H33NaO8）的含量。

本方法适用于注射用氢化可的松琥珀酸钠。

方法原理：

供试品经称取制成流动相溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长242nm处检测氢化可的松琥珀酸钠吸收值，计算出其含量。

试剂：

1. 甲醇

2. 磷酸盐缓冲液

仪器设备：

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按氢化可的松琥珀酸钠峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 磷酸盐缓冲液=43 57

2.2 检测波长：242nm

2.3 柱温：室温

试样制备：

1. 磷酸盐缓冲液

8mmol/L磷酸二氢钾溶液，用8mmol/L磷酸氢二钾溶液调pH值5.0±0.1，临用前新配。

2. 称取供试品

取本品装量差异项下混合均匀的内容物适量，精密称定。

3. 对照品溶液的制备

精密称取氢化可的松琥珀酸钠对照品适量，加流动相溶解并定量稀释成每1mL含40μg的溶液。

精密称取氢化可的松对照品适量，加流动相溶解并定量稀释成每1mL含10μg的溶液。

4. 供试品溶液的制备

将上述供试品加流动相溶解并定量稀释制成每1mL含40μg的溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤：

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序依次为17-氢化可的松琥珀酸钠、21-氢化可的松琥珀酸钠和游离氢化可的松，用紫外吸收检测器，按外标法以峰面积计算，17-氢化可的松琥珀酸钠峰和21-氢化可的松琥珀酸钠峰面积总和，作为氢化可的松琥珀酸峰面积计算，并乘以0.748，折合为氢化可的松的量与游离氢化可的松的量合并计算。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.404。