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方法名称:羚羊感冒片-牛蒡苷的测定-高效液相色谱法
应用范围:本方法采用高效液相色谱法测定羚羊感冒片中牛蒡苷的含量。
本方法适用于中成药羚羊感冒片。
方法原理:本品加50%甲醇超声处理,放冷,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长260nm处检测牛蒡苷的吸收值,计算出其含量。
试剂:1.甲醇
2.乙腈
仪器设备:1仪器
1.1高效液相色谱仪
1.2色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按牛蒡苷峰计算应不低于4000。
1.3紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:乙腈水=2575
2.2检测波长:260nm
2.3柱温:室温
试样制备:1.称取供试品
取本品10片,除去包衣,精密称定,研细,取适量(约相当于1片重量),精密称定,为供试品。
2.对照品溶液的制备
精密称取牛蒡苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。
3.取本品10片,除去包衣,精密称定,研细,取适量(约相当于1片重量),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇20mL,,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHz)20分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
操作步骤:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长260nm处测定牛蒡苷(C27H34O11)的峰面积,计算出其含量。
参考文献:中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p607。