1961年Miyairi等［13］报道，狭霉素A、C在合成培养基中均有抗微生物的活性，在天然培养基中无活性，其活性能被鸟嘌呤、鸟嘌呤核苷、腺嘌呤核苷、次黄嘌呤核苷、黄嘌呤核苷及相关物质抑制。狭霉素A能抑制枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)核酸片段合成过程中32P的进入，通过紫外吸收法可以看到核酸数量的减少；在狭霉素A作用于枯草芽孢杆菌PCI219 1h后再加入14C标记的氨基酸，可以看到狭霉素A能减弱14C标记的氨基酸进入枯草芽孢杆菌PCI219机体的蛋白质片段。根据这些生化现象与专性抑制剂化合物的结构推断，狭霉素A在微生物的核酸及蛋白质的生物合成代谢中具有抑制剂作用，所以表现出抗微生物的活性。狭霉素C抗肿瘤转移的作用机制也是类似情况。

1964年Bloch［14］进一步明确了狭霉素A的作用机制，指出它对磷酸核糖焦磷酸化激酶有抑制作用，从而抑制XMP(黄嘌呤核苷酸)转化为GMP(鸟嘌呤核苷酸)。