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弯曲菌属微生物学检验

2012-10-26 16:04 医学教育网
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1.直接涂片

(1)悬滴标本检查:取新鲜粪便于载玻片上,加生理盐水混合后,上覆盖玻片置显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。脑脊液经3000r/min离心沉淀15min后,制成涂片做悬滴检查。

(2)革兰染色检查: 为革兰氏阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。

2.分离培养

粪便和肛拭子标本直接接种于改良弯曲菌琼脂平板,如改良的Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板;血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后,转种弯曲菌分离培养基,置43℃、37℃,在微需氧环境下培养24~72小时,观察菌落特征。

3.鉴定

(1)属的鉴定特征:革兰氏阴性细小弯曲杆菌,单鞭毛具有投镖样或螺旋样动力,需氧环境不生长,微需氧条件下,在弯曲菌选择培养基上形成两种类型菌落。不分解葡萄糖。弯曲菌属的鉴定要点为氧化酶阳性、革兰氏阴性、菌体弯曲或呈S形。最常用的鉴定试验有生长温度(25℃、37℃、42℃)试验、过氧化氢试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验、硫化氢试验等等。

(2)种和亚种鉴定:见表

  触酶 25℃生长 43℃生长 1%甘氨酸 H2S 马尿酸 3.5%NaCl 脲酶
胎儿弯曲菌 ? ? ? ? ? ? ? ?
胎儿亚种 + + - + + ? ? -
性病亚种 + + - - - ? ? -
空肠弯曲菌 + - + ? ? + ? -
大肠弯曲菌 + - + ? ? - ? -
痰液弯曲菌 ? ? ? ? ? ? ? ?
牛亚种 - - + ? ? ? + -
痰液亚种 - - + + ? ? - -
黏膜亚种 - - + - ? ? - -
简明弯曲菌 - - -       - -
幽门螺旋菌 + - - ? ? ? - +

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