方法名称： 双黄连片－黄芩苷的测定－高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定双黄连片中黄芩苷的含量。

本方法适用于中成药双黄连片。

方法原理： 本品加50%甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长274nm处检测黄芩苷的吸收值，计算出其含量。

试剂： 1. 50%甲醇

2. 冰醋酸

仪器设备： 1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于1500。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 冰醋酸 ＝50 50 1

2.2检测波长：274nm

2.3柱温：室温

试样制备： 1. 称取供试品

取装量差异项下的本品，研细，取约0.2g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取黄芩苷对照品适量，加50%甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品，研细，取约0.2g，精密称定，置50mL量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理（功率250W，频率33kHz）20分钟，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置10mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长274nm处测定黄芩苷（C21H18O11）的峰面积，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p406。