分离方法：

目前胚胎干细胞来源主要是胚泡内细胞群和生殖嵴中的原始生殖细胞

免疫学方法：干细胞表面有许多特殊标记，利用这些标记，采用荧光细胞分离器从单细胞悬液中的分离纯化干细胞。

免疫外科方法：该方法基本原理是利用囊胚腔对抗体的不通透性，通过抗体、补体结合对细胞的毒性杀伤作用，去除滋养层细胞，保留CIM进行培养。

组织培养：将4-6天的胚胎取出培养，滋养层在培养皿底部平铺生长，而CIM形成卵圆柱装结构，在显微镜下用玻璃针挑出这种柱状结构，消化传代

显微外科学法：利用显微镜直接将CIM从胚泡中吸出进行培养。

鉴定方法：

1形态学检测：体积小、核大、核质比高，一个或多个突起的核仁，常染色质，胞质少、结构简单。

体外培养：细胞排列紧密，集落状生长。碱性磷酸酶染色，细胞呈棕红色，周围成纤维细胞淡黄色。细胞克隆与周围界限明显，细胞克隆间界限不清、形态多样，多数呈岛状或巢状。

2碱性磷酸酶活性的检测——染色后呈深蓝紫色

3体内分化实验：畸胎瘤

4体外分化实验：囊状简单胚体或类胚体，常见多种类型细胞混杂在一起

5核型分析法：二倍体正常核型

6OCT活性检测： 多能性基因标志。OCT抗血清和间接免疫荧光法检测OCT基因表达产物

ES细胞应用：

（1）ES细胞的应用前景

1.动物克隆及人类治疗性克隆

2.在转基因动物中的应用

3.制备嵌合体动物

（2）ES细胞研究面临的难题

1.体外培养ES细胞需筛选适宜的培养条件，平衡增殖和分化之间的矛盾

2.高度未分化，具形成畸胎瘤的可能性

3.真正用于器官克隆与移植仍需技术上的突破

4.伦理学