方法名称：

七叶神安片－人参皂苷Rb3的测定－高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定七叶神安片中人参皂苷Rb3的含量。

本方法适用于三七叶提取的总皂苷制成的片。

方法原理：

本品加乙醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长203nm处检测人参皂苷Rb3的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1. 乙醇

2. 乙腈

3. 0.2%磷酸溶液

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按人参皂苷Rb3峰计算应不低于6000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈为流动相A，0.2%磷酸溶液为流动相B

时间（分钟）

流动相A（%）

流动相B（%）

0~19

30→35

70→65

19~21

35→50

65→50

21~26

50

50

2.2检测波长：203nm

2.3柱温：室温

试样制备：

1. 称取供试品

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于含三七叶总皂苷100mg），为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取人参皂苷Rb3对照品适量，加乙醇制成每1mL含0.5mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于含三七叶总皂苷100mg），置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入乙醇20mL，密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率50kHz）15分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜（0.45mm）滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长203nm处测定人参皂苷Rb3（C53H90O22）的峰面积，计算出其含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p303。