照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录Ⅴ D）测定。

色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾10.54g，加水775ml使溶解，用85%磷酸溶液调节pH值2.5）-乙腈（775：225）为流动相；检测波长为210nm，理论板数按克林霉素磷酸酯峰计算应不低于1500.克林霉素磷酸酯与相邻峰的分离度应符合规定。

测定法精密量取该品适量，加流动相稀释成每1ml中约含0.48mg的溶液，精密量取10μl注入液相色谱议，记录色谱图；另取克林霉素磷酸酯对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算供试品中克林霉素的含量。