方法名称:菝葜-薯蓣皂苷元的测定-高效液相色谱法
应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元的含量。
该方法适用于百合科植物菝葜Smilax china L.的干燥根茎。
方法原理:该品加乙醇在索氏体取器中加热回流,回收溶剂浓缩加盐酸加热回流,冷却液加石油醚振摇,提取液蒸干,残渣加乙腈溶解并定容,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长203nm处检测薯蓣皂苷元的吸收值,计算出其含量。
试剂:
1. 乙腈
2 .乙醇
3 .盐酸
4 .石油醚
仪器设备:
1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按薯蓣皂苷元峰计算应不低于8000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:乙腈 水=90 10
2.2检测波长:203nm
2.3柱温:35℃
试样制备:
1. 称取供试品精密称定该品粉末(过二号筛)8g,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取薯蓣皂苷元对照品适量,加乙腈制成每1mL含0.2mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
取该品粉末(过二号筛)约8g,精密称定,置索氏提取器中,加乙醇适量,浸渍过夜,加热回流至提取液近无色,回收溶剂至约100mL,加盐酸16mL,加热回流水解2小时,冷却,用石油醚(60~90℃)振摇提取4次,每次40 mL, 合并提取液,回收溶剂至干,残渣加乙腈溶解并转移至10mL量瓶中,加乙腈至刻度,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。
操作步骤:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长203nm处测定薯蓣皂苷元(C27H42O3)的峰面积,计算出其含量。