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己烯雌酚注射液含量测定

2012-08-27 18:05 医学教育网
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对照品溶液的制备:精密称取己烯雌酚对照品适量,加乙醇溶解并定量稀释制成每1ml 中含20μg 的溶液,与同体积的2 %磷酸氢二钾溶液混合,即得。 供试品溶液的制备 精密量取供试品适量(约相当于己烯雌酚1 ~10mg),置分液漏斗中,加石油醚(沸点60~90℃)75ml,用氢氧化钠试液提取3次 (25ml、15ml、10ml),合并提取液,用氯仿振摇洗涤2 次,每次10ml,弃去氯仿层,在水层内注意加入稀磷酸溶液(1→6),调节pH值至9.5,再用氯仿提取4 次,每次20ml,合并氯仿提取液,经铺有无水硫酸钠的漏斗滤入100ml 量瓶中,滤器用氯仿洗涤,洗液与滤液合并,并用氯仿稀释至刻度,摇匀;精密量取适量(约相当于己烯雌酚0.2mg ),置水浴上蒸干,冷却,精密加入乙醇10ml使溶解,与同体积的2 %磷酸氢二钾溶液混合,即得医|学教育网搜集整理。

紫外光照射条件的选定:取对照品溶液,置1cm 石英池中,于20W紫外光灯管(横置,支架高约8~10cm,两侧应加遮蔽)的正下方,自上而下照射10分钟,在418nm的波长处测定吸收度(以未经照射的对照品溶液为空白),然后按同一方法再照射数次并测定吸收度,每次照射1 分钟,直至吸收度不再增加为止,以总的照射时间作为选定的条件,即得。如照射时间增至20分钟以上尚未达到最大吸收值,则应增加紫外光的强度;如照射时间在10分钟内即已达到最大值,则可加大灯管与溶液之间的距离。

测定法:取同体积的对照品溶液与供试品溶液,分别置1cm 石英池中,按紫外光照射条件的选定项下的方法,在选定的照射时间内照射后,照分光光度法分别用未经照射的相应溶液作空白,在418nm 的波长处测定各自的吸收度,计算,即得。

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