双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成，具有辛凉解表、清热解毒功效，对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病有一定疗效。其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素是其主要活性成分。2005年版《中华人民共和国药典》（一部）采用高效液相色谱法只测定了绿原酸、黄芩苷、连翘苷的含量，而且是采用包括甲醇一醋酸一水、乙腈一醋酸一水的不同流动相分别测定。本试验参照文献，通过优化色谱条件，建立了不经提取分离，利用梯度洗脱法同时测定上述4种成分含量的高效液相色谱法，具有简便可行、准确、快速的特点，减少了配制流动相的步骤和进样次数，提高了工作效率，取得了满意效果。

方法名称： 双黄连口服液—黄芩甙的含量—高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量。

本方法适用于由金银花,黄芩,连翘等精制而成的双黄连口服液中黄芩甙的含量测定。

方法原理： 利用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定双黄连口服液中黄芩甙含量。固定相为Nova-Pak C18反相柱;流动相为甲醇 水 磷酸=50 50 0.2;检测波长为276nm。

试剂： 甲醇（色谱纯）。

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Nova-PakC18反相柱（4μm,250mm×4mm）

2 色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 磷酸=50 50 0.2

2.3柱温：40℃

2.4流速：0.8ml/min

2.5检测波长：276nm

试样制备： 1.标准溶液的制备

精密称取一定量的黄芩甙对照品,用50%甲醇配成0.0717mg/mL的标准溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密吸取双黄连口服液0.5mL,置100mL容量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,混匀即可作为供试液。另取处方中除黄芩外的其余药材,按规定工艺制备成双黄连口服液后,依供试液制备方法制成空白液。

操作步骤：

1.标准曲线的绘制

精密吸取黄芩甙对照品标准溶液5,10,15,20,25μL进样测定峰面积,以黄芩甙量（μg）为横坐标X,峰面积为纵坐标Y得回归方程。

2. 供试品的测定

分别吸取对照品溶液和供试品溶液20μL进样测定,按外标法计算样品中黄芩甙含量。

参考文献： 莫志江,莫可元.反相高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量.时珍国医国药,2000,11（3）:196-197.