照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。色谱条件与系统适用性试验 用硅胶为填充剂；以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-三氯甲烷（44:42:14）为流动相；检测波长为265nm。取本品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，取上述溶液于太阳光或钨灯光下照射0.5小时后，产生一定量反式阿法骨化醇，精密量取20μl注入液相色谱仪，反式阿法骨化醇峰对阿法骨化醇峰的相对保留时间约为0.92，阿法骨化醇峰与反式阿法骨化醇峰的分离度应符合要求；另取上述溶液2ml，于80℃水浴加热回流2小时，放冷，产生一定量前阿法骨化醇，精密量取20μl注入液相色谱仪，前阿法骨化醇峰对阿法骨化醇峰的相对保留时间约为1.3，阿法骨化醇峰与前阿法骨化醇峰的分离度应符合要求。理论板数按阿法骨化醇峰计算不低于2000。

测定法 取本品适量，精密称定，用流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1μg的溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿法骨化醇对照品适量，精密称定，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。