方法名称： 去乙酰毛花苷注射液—去乙酰毛花苷的测定—分光光度法

应用范围： 本方法采用分光光度法测定去乙酰毛花苷注射液中去乙酰毛花苷的含量。

本方法适用于去乙酰毛花苷注射液。

方法原理： 供试品加70%乙醇定量稀释制成供试液，再加入碱性三硝基苯酚试液后，在20~25℃放置30分钟，置紫外可见分光光度计，于485nm波长处测定吸收度，计算出其含量。

试剂： 70%乙醇

仪器设备： 紫外可见分光光度计

试样制备： 1.对照品溶液的制备

精密称取去乙酰毛花苷对照品适量，加70%乙醇使溶解，制成每1mL含去乙酰毛花苷40µg的溶液，即得对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密量取供试品5mL，置25mL量瓶中，用70%乙醇的稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 精密量取对照品溶液与供试品溶液各10mL，分别精密加入碱性三硝基苯酚试液6mL，摇匀，在20~25℃放置30分钟后，照紫外分光光度法，于波长485nm处测定吸收度。

注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。