方法名称： 八珍丸—芍药苷的测定—高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定八珍丸中芍药苷的含量。

本方法适用于中成药八珍丸。

方法原理： 供试品加稀乙醇超声提取、并补足减失的重量后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长230nm处检测芍药苷的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1. 乙腈

2. 稀乙醇

仪器设备： 1 仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 水= 17 83

2.2 检测波长：230nm

2.3 柱温：室温

试样制备：

 1.稀乙醇

取乙醇529mL，加水稀释至1000mL，即得。

2. 称取供试品

取本品水蜜丸粉碎成细粉，精密称取0.3g； 或取大蜜丸剪碎，精密称取0.5g。

3. 对照品溶液的制备

精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的芍药苷对照品10mg, 置25mL量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取1mL，置10mL量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀（每1mL中含芍药苷40μg）。

4. 供试品溶液的制备

供试品置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20mL，密塞，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，紫外吸收检测器，于波长230nm处测定芍药苷（C23H28O11）的吸收值，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p.312。