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照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(54:46
)为流动相;检测波长为230nm。理论板数按硝酸异山梨酯峰计算应不低于5000,硝酸异
山梨酯峰和内标物质峰的分离度应符合要求。 内标溶液的制备 取氢化泼尼松适量,加流动相溶解并稀释制成每1ml 中约含0.08
mg的溶液,作为内标溶液。
测定法 取硝酸异山梨酯对照品约25mg,精密称定,置50ml量瓶中,加甲醇27ml溶
解后,用水稀释,放冷至室温,再用水稀释至刻度,精密量取对照品溶液与内标溶液各
5ml,置25ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,取20μl 注入液相色谱仪,记录色谱
图;另取硝酸异山梨酯约25mg,同法测定。按内标法以峰面积计算,即得。