方法名称： 小儿热速清口服液 –黄芩苷的测定--高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定小儿热速清口服液中黄芩苷的含量。

本方法适用于中成药小儿热速清口服液。

方法原理： 供试品用大孔吸附树脂柱净化后，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长276nm处检测黄芩苷的吸收值，计算出其含量。

试剂： 1. .D101大孔吸附树脂

2. 甲醇

3. 磷酸

4. 乙醇

仪器设备： 1 仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按黄芩苷峰计应不低于2500。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水 磷酸 = 47 53 0.2

2.2 检测波长：276nm

2.3 柱温：室温

3. 大孔吸附树脂柱（内径约1.5 cm，填充高度10cm）

试样制备： 1. 量取供试品

精密量取本品0.5mL，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取黄芩苷对照品约10mg, 精密称定，置20mL量瓶中，加50%甲醇适量，置热水浴中振摇使溶解，放置至室温，并稀释至刻度，摇匀。

3. 供试品溶液的制备

湿法装柱：将D101大孔吸附树脂与水混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后加入水将附着管壁的树脂洗下，至水从色谱柱自然流下，色谱柱面平整。

供试品加入柱中后，以每分钟1.5mL的流速，用水70mL洗涤，继用40%乙醇洗脱，弃去7~9mL，收集续洗脱液，置50mL量瓶中，至刻度，摇匀，为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液5μL与供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，紫外吸收检测器，于波长276nm处测定黄芩苷（C21H18O11）的吸收值，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p.347。