方法名称： 黄杨宁片—黄杨宁的测定—分光光度法

应用范围： 本方法采用酸性染料比色法测定黄杨宁片中黄杨宁以环维黄杨星D(C26H46N2O)的含量。

本方法适用于中成药黄杨宁片。

方法原理： 供试品粉末加磷酸盐缓冲液溶解，与染料溶液混和，再加入氯仿，置分液漏斗中，取氯仿层于波长420nm处测定吸收度，与对照品黄杨宁的结果比较，计算。

试剂： 1. 溴麝香草酚蓝

2.溴酚蓝

3 .溴甲酚绿

4 .氯仿

5 .磷酸盐缓冲溶液

仪器设备： 紫外可见分光光度计

试样制备： 1. 称取供试品

取黄杨宁片20片，精密称取粉末约0.88g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取黄杨宁片及各种染料适量，配制成黄杨宁浓度为2.4×10－5mol/L及染料浓度约为7.0×10－5mol/L水溶液（pH均为4.55）。精密量取黄杨宁及染料溶液各5.0mL于一分液漏斗中，摇匀，再准确加入氯仿10.0mL，振摇2min，静置，使之分层。

3. 供试品溶液的制备

将供试品置50mL量瓶中，甲磷酸盐缓冲液适量，超声溶解，摇匀，过滤，准确加入氯仿10.0mL，振摇2min，静置，使之分层，配制供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一，“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 1.供试品的测定

分取对照品和供试品澄清的氯仿层，于波长420nm处测定吸收度，计算。

注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在０.３－０.７之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。