方法名称: 口炎清颗粒-绿原酸的测定-高效液相色谱法
应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定口炎清颗粒中绿原酸的含量。
本方法适用于中成药口炎清颗粒。
方法原理: 供试品于具塞锥形瓶中,加50%甲醇溶解,过滤,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长327nm处检测绿原酸的吸收值,计算出其含量。
试剂: 1. 50% 甲醇.
2. 0.4%磷酸溶液
3 乙腈
仪器设备: 1 仪器
1.1高效液相色谱仪
1.2色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于1000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:乙腈 0.4%磷酸溶液 =13 87
2.2检测波长:327nm
2.3柱温:室温
试样制备: 1, 称取供试品
精密称取取装量差异项下的本品,研细,取1.5g或0.5g(无蔗糖),为供试品。
2, 对照品溶液的制备
精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇溶液制成每1mL含25mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
取装量差异项下的本品,研细,取约1.5g或约0.5g(无蔗糖),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇50mL,密塞,放置15分钟,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长327nm处测定绿原酸(C16H18O9)的峰面积,计算出其含量。
参考文献: 中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p334。