免疫学检验中标本的正确收集及处理方法是什么呢?为了帮助更多考生了解,医学教育网为大家搜集整理如下:
用于免疫检验的临床标本最为常用的是血清(浆)。对用于激素和治疗药物测定的血清标本,要注意收集时间甚至体位对测定结果的影响。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等检测的血清标本无此影响,但可能存在干扰因素。
(一)内源性干扰因素
包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。
1.类风湿因子(RF) 为避免RF的干扰,需采取:
(1)改变标记抗体。
(2)标本中RF用变性IgG预先封闭:将经热变性(63℃,10分钟)的兔、羊等的IgG加入到标本稀释液中,或是将该变性IgG连接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔,然后加入临床血清标本,反应后,再吸出标本进行检测。此外,在测定特异IgM时,也可使用抗人IgG去除临床标本中RF和IgG。
(3)测定抗原时,可在标本中加入可使RF降解的还原剂如2-巯基乙醇。
2.补体 由补体引起的干扰可通过下述方法避免:
(1)对临床血清标本加热灭活补体。
(2)包被或标记二抗使用特异的鸡抗体。
3.异嗜性抗体 人类血清中含有抗啮齿类动物(如鼠等)的Ig的抗体,即天然异嗜性抗体。异嗜性抗体可通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。可通过下述方法避免:
(1)使用特异的兔F(ab')2片段作为固相或测定标记抗体。
(2)在标本或标本稀释液中加入过量的动物Ig,封闭可能存在的异嗜性抗体。但加入量不足或亚类不同时无效。
(3)使用靶特异的非Ig亲和蛋白替代固相或标记抗体之一。
(4)使用特异的鸡抗体作为固相和测定抗体。
4.由抗鼠抗体引起的干扰可通过下述方法避免:
(1)使用特异的抗体F(ab')2片段作为固相或测定标记抗体。
(2)在标本或标本稀释液中加入过量的鼠Ig,封闭可能存在的抗鼠抗体。
(3)使用特异的鸡抗体IgG作为固相和测定抗体。鸡抗体IgG不与人抗鼠抗体反应。因而,用其作为固相或标记抗体不会出现假阳性结果。
(二)外源性干扰因素
包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、反复冻融和标本凝固不全等。
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