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1.凝固法
也称为生物学法,将凝血因子或激活剂加入到血浆中,使血浆发生凝固,凝血仪记录血浆凝固过程中一系列的变化(如光、电、机械运动等),并将这些变化的信号转变成数据,计算机处理分析后得出检测结果。
目前在凝血仪上使用的凝固法大致分为三类:光学法、黏度法和电流法。
(1)光学法:待测血浆在凝固过程中,纤维蛋白原逐渐转变为纤维蛋白,其理学性质也发生改变,透射光和散射光强度发生改变,凝血仪根据这种光学性质的改变来判断凝固终点。光学法可分为透射比浊法和散射比浊法。
(2)黏度法:在待测血浆中加入小磁珠,利用变化的磁场使小磁珠产生运动,随血浆的凝固,血液黏度增加,小磁珠的运动逐渐减弱,仪器根据小磁珠运动强度的变化来确定凝固终点。
(3)电流法:该法将待测血浆作为电路的一部分,由于纤维蛋白具有导电性,可利用电流的断与否来判断纤维蛋白的形成与否,即判断凝固终点。
2.发色底物法
该法主要是利用测定产色物质的吸光度变化来推算所测定物质的含量。
基本原理为:首先人工合成含某种活性酶裂解点的化合物,此化合物上连接有产色物质(如对硝基苯胺,PNA),待测血浆中含有活性酶或往样品中加入活性酶,化合物中的产色物质可被裂解下来,使待测样本出现颜色变化,根据此颜色变化可推算出被检物质的含量。
一般产色物质选用PNA,游离的PNA呈黄色,测定波长为405nm,而连接PNA的化合物为无色。
利用该法检测的物质有ATⅢ、PLG、PC、PS等。
3.免疫学法
利用抗原抗体的特异性结合反应来对被测物质进行定量。
自动凝血仪多采用免疫比浊法进行测定,又分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。
利用该法检测的物质有D-二聚体等。
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