【关键词】  Fascin

　　Expression of Fascin1 in human colorectal cancer and its significance

　　LIU Li， DING YanQing

　　Department of Pathology， Nanfang Hospital， Southern Medical University， Guangzhou 510515， China

　　【Abstract】 AIM： To investigate the correlation between Fascin1 expression and carcinogenesis and biological behavior of colorectal cancer （CRC）。 METHODS： The expression of Fascin1 was examined in 80 specimens of  CRC， 40 of paired normal colorectal mucosae and 37 of regional lymphatic metastases by immunohistochemical method. RESULTS： Fascin1 was expressed heterogeneously among the normal colorectal mucosae， CRC and lymphatic metastases （χ2＝30.917， P=0.000）。 Fascin1 was higher expressed in CRC compared with normal colorectal mucosae （Z=-3.912， P=0.000）， and Fascin1 expression was significantly stronger in lymphatic metastases than that in primary CRC （Z＝-2.419， P=0.016）。 Furthermore， Fascin1 expression in CRC with lymph node metastasis was higher than that in CRC without lymph node metastasis （Z=-2.432， P＝0.015）。 Expression levels of Fascin1 protein， showing no correlation with the differentiation of CRC （χ2＝0.333， P=0.847）， was positively correlated with the invasive depth of CRC （Z=-2.074， P=0.038）。 CONCLUSION： Fascin1 expression plays an important role in invasion and metastasis of CRC. Clinically it may be a useful indicator of the tumor invasion and metastasis in CRC.

　　【Keywords】 Fascin1； colorectal neoplesms； neoplasm invasiveness； lymphaticmetastasis

　　【摘要】 目的： 探讨Fascin1蛋白表达与结直肠癌发生及其生物学行为的关系。  方法： 应用免疫组化SP法，检测结直肠癌80例、正常黏膜40例以及结直肠癌区域淋巴结转移癌37例Fascin1蛋白的表达。 结果： 在结直肠正常黏膜、癌及淋巴结转移癌中Fascin1蛋白表达差异有显著性（χ2＝30.917， P=0.000）。 两两比较发现，癌组织Fascin1表达比正常黏膜强（Z=-3.912， P=0.000），淋巴结转移癌组织表达比原发结直肠癌组织强（Z＝-2.419， P=0.016）；在结直肠癌组织中，伴发淋巴结转移的结直肠癌组织比未发生转移的结直肠癌组织Fascin1表达明显增强，差异具有显著性（Z=-2.432， P＝0.015）；并且，Fascin1蛋白表达水平与结直肠癌的浸润深度呈正相关（Z=-2.074， P=0.038），而与结直肠癌的分化程度无关（χ2＝0.333， P=0.847）。 结论： Fascin1蛋白表达与结直肠癌的浸润、转移密切相关，可作为结直肠癌浸润、转移的指标。

　　【关键词】 Fascin1；结直肠肿瘤；肿瘤浸润；淋巴转移

　　0引言

　　Fascin1蛋白的主要功能是与肌动蛋白结合，并将其捆绑成平行的肌动蛋白束，使细胞形成线状或片足的突起，从而肿瘤细胞的运动性增加，侵袭转移能力增强［1］。 Fascin1在人类的许多肿瘤中表达上调，如食道癌、胰腺癌等，并且与临床病理学和预后不良相关［2］。 目前Fascin1在人结直肠癌中的表达与临床病理的关系还不清楚，因此，我们采用免疫组化的方法检测正常结直肠黏膜、结直肠癌以及淋巴结转移癌组织中Fascin1表达情况，以探讨Fascin1表达与结直肠癌的发生及生物学行为的关系。

　　1材料和方法

　　1.1材料200201/200412手术切除结直肠癌标本80例，男52例，女28例，年龄40~75（平均55）。 正常结直肠黏膜40例取自手术切除标本边缘，区域淋巴结转移癌37例取自手术切除标本所附淋巴结。 全部标本术前均未接受化疗及放疗， 40 g/L中性甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm厚切片，分别进行HE染色和免疫组化检测。

　　1.2方法应用免疫组化方法（SP法）检测正常结直肠黏膜组织、结直肠癌组织以及区域淋巴结转移癌组织中Fascin1表达情况，并分析其与肿瘤细胞分化程度、浸润深度及淋巴结转移的相关性。 鼠抗人Fascin1购自Chemicon公司，SP免疫组化试剂盒和DAB显色试剂盒购自福州迈新公司。 免疫组化方法按照试剂盒操作说明书操作。 Fascin1抗体工作浓度为1∶400，DAB显色，苏木精复染，中性树脂封固。 Fascin1在间质的表达为自身切片的阳性对照，PBS液取代一抗作阴性对照。 结果判断方法参照许良中等的方法［3］。 染色强度分数标准：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。 同样物镜下技术阳性细胞数，1%～10％为1分，11%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。 两项得分相乘，满3分为“＋”；4分为“”；5分以上为“”。 “＋～”为阳性表达。

　　统计学方法：采用SPSS12.0统计软件包进行数据处理，多组间比较采用非参数KruskalWallis检验，两两比较采用MannWhitney检验。

　　2结果

　　2.1Fascin1蛋白的表达Fascin1阳性产物主要位于胞质内，且在间质中高表达（图1），因此，在间质中的表达可以作为内对照。 Fascin1在正常结直肠黏膜、结直肠癌及淋巴结转移癌组织3组中的表达明显不同（表1），差异具有显著性（χ2＝30.917， P<0.01）。 两两比较发现，癌组织Fascin1表达明显比正常结直肠黏膜强（Z=-3.912， P<0.01），淋巴结转移癌组织阳性表达又明显比癌组织表达强（Z=-2.419， P<0.05）。

　　A：正常黏膜阴性；B：癌阴性；C：癌阳性；D：淋巴结转移癌阳性。

　　图1结直肠癌Fascin1蛋白表达SP×400（略）

　　2.2Fascin1表达与癌特性的关系Fascin1表达与结直肠癌组织学分化程度没有相关性，Fascin1在高、中及低分化的癌组织中表达无显著性差异（χ2＝0.333， P>0.05）。 但是随着结直肠癌浸润肠壁深度的增加，Fascin1表达的阳性率逐渐增强，浸润至深肌层或全层的癌组织Fascin1表达阳性率明显高于浸润较浅的组织，差异具有显著性（Z=-2.074， P<0.05）。 Fascin1表达与结直肠癌淋巴结转移显著相关，有区域淋巴结转移的结直肠癌Fascin1表达阳性率明显高于无区域淋巴结转移者（Z=-2.432， P<0.05）。

　　表1Fascin1在结直肠黏膜、结直肠癌及淋巴结转移癌中的表达情况（略）

　　aP<0.05， bP<0.01  vs相应项目。

　　3讨论

　　结直肠癌的进展和侵袭与癌细胞运动性增加和肌动蛋白细胞骨架结构改变密不可分，三维的肌动蛋白微丝的结构和功能是由众多肌动蛋白捆绑蛋白（actinbundling protein）调节和控制［4］。 人Fascin1蛋白是交联蛋白，定位于运动细胞形成钉状突起和片状突起的肌动蛋白束的核心。 Fascin1表达与肿瘤的高侵袭性呈正相关，如在食管癌、胃癌等，Fascin1表达都与肿瘤的进展相关，并且与预后不良和/或低的生存率正相关［5-6］。 Xie等［7］利用RNA干扰的方法沉默Fascin1的表达，发现食管癌细胞的增殖速度和侵袭性明显降低。 在人结直肠癌，Jawhari等［8］发现癌组织Fascin1表达比正常结直肠黏膜明显增强，但是他们没有更深入的探讨Fascin1与结直肠癌临床病理学的联系，因此，本研究进一步探讨了Fascin1在人结直肠癌表达的临床意义。 我们的结果显示，Fascin1在正常结直肠黏膜几乎不表达，原发结直肠癌Fascin1的表达明显高于正常结直肠黏膜，支持了Jawhari等的研究结果。 我们还发现，浸润至深肌层或全层的癌组织Fascin1表达阳性率明显高于浸润较浅的组织，提示随着癌变的发生和发展，Fascin1蛋白表达逐渐增强。 此外，Fascin1表达与结直肠癌淋巴结转移显著相关，有区域淋巴结转移的结直肠癌Fascin1表达阳性率明显高于无区域淋巴结转移者，转移癌Fascin1表达水平明显高于原发癌，说明Fascin1的表达与肿瘤转移密切相关。 我们的结果没有发现Fascin1的表达与肿瘤的分化相关。 Fascin1在肿瘤组织中表达上调的分子机制还不清楚，因此，需要更为深入大规模实验来证实Fascin1在肿瘤中的作用及其分子机制。

　　【参考文献】

　　［1］ Adams JC. Fascin protrusions in cell interactions［J］。 Trends Cardiovasc Med， 2004，14（6）：221-226.

　　［2］ Hashimoto Y， Skacel M， Adams JC. Roles of Fascin in human carcinoma motility and signaling： Prospects for a novel biomarker？［J］。 Int J Biochem Cell Biol， 2005，37（9）：1787-1804.

　　［3］ 许良中，杨文淘。 免疫组织化学反应结果的判断标准［J］。 中国癌症杂志， 1996，6（4）：229-231.

　　［4］ Buda A， Pignatelli M. Cytoskeletal network in colon cancer： from genes to clinical application ［J］。 Int J Biochem Cell Biol， 2004，36（5）：759-765.

　　［5］  Hashimoto Y， Ito T， Inoue H， et al. Prognostic significance of Fascin overexpression in human esophageal squamous cell carcinoma ［J］。 Clin Cancer Res， 2005，11（7）：2597-2605.

　　［6］ Hashimoto Y， Shimada Y， Kawamura J， et al. The prognostic relevance of Fascin expression in human gastric carcinoma ［J］。 Oncology， 2004，67（34）：262-270.

　　［7］ Xie JJ， Xu LY， Zhang HH， et al. Role of Fascin in the proliferation and invasiveness of esophageal carcinoma cells ［J］。 Biochem Biophys Res Commun， 2005， 337（1）：355-362.

　　［8］ Jawhari AU， Buda A， Jenkins M， et al. Fascin， an actinbundling protein， modulates colonic epithelial cell invasiveness and differentiation in vitro ［J］。 Am J Pathol， 2003，162（1）：69-80.