【关键词】  透明质酸；激活素A；肿瘤坏死因子-α；肝纤维化

　　摘要  目的：研究慢性乙肝（CHB）患者血清透明质酸（HA）、激活素A（ACTA）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量与肝组织炎症活动及纤维化程度的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫吸附试验（RIA）测定96例慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α含量，同时进行肝组织活检，对肝组织进行炎症分级及纤维化分期，分析以上三项指标与肝组织病理变化的关系。结果：慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α含量与慢性乙肝发展阶段性相一致，在慢性乙肝重度与肝硬化（LC）阶段达最高水平。与肝组织炎症及纤维化程度一致，在纤维化分期S4处于最高水平。结论：血清HA、ACTA、TNF-α与肝纤维化的发病机制密切相关，检测血清以上三项指标对于肝纤维化动态观察、早期诊断及预后评估具有一定的理论和临床价值。

　　关键词  透明质酸；激活素A；肿瘤坏死因子-α；肝纤维化

　　Relationship between the Level of Serum HA，ACTA，TNF-α and the Pathological Changes of the Liver Tissue in Patients with Chronic Hepatitis

　　YANG Qing， BAI Jing， WANG Xingyun， LIU Zhonghui

　　（The First Affiliated Hospital，Jilin University， Changchun 130021，China）

　　Abstract  Objective：To study the relationship between the serum hyaluronic acid（HA），activinA （ACTA），tumour necrosis factor-α（TNF-α）and  the inflammatory reaction ，pathological changes of the liver tissue in patients with chronic hepatitis.Methods： the serum HA，ACTA，TNF-αcontent was assayed by Elisa and RIA in 96 cases of chronic  hepatitis B， and liver biopsy，inflammation classification and fibrosis stage division were carried out at the same time ，then the relationship between the three indexes above and the pathological changes of the liver tissue was analysed. Results：The level of the serum HA， ACTA ，TNF-α in patients with chronic hepatitis B was consistent with its development stages， which reached the highest level at the severe stage of chronic hepatitis B and in liver cirrhosis .They were also consistent with the level of liver tissue inflammation and fibrosis，manifesting the highest level in inflammation fobrosis stage S4. Conclusion： The serum HA，ACTA，TNF-αare closely correlate to the pathogenesis of the hepahepatic fibrosis.The three index  above is of some theoretic and clinical significance in the dynamic observation of liver fibrosis，the earlyβdiagnosis， therapy and  the estimate of the prognosis.

　　Key words  Hyaluronic acid；Activin A；Tumour necrosis facor-α；Hepatic fibrosis

　　各种病因所引起的慢性肝病绝大多数都有肝纤维化，其中25%~40%最终发展为肝硬化及肝癌，早期诊断及逆转肝纤维化已成为慢性肝病防治研究中的一个重要课题[1].本研究对96例慢性乙肝患者进行肝组织活检、检测其血清HA、ACTA、TNF-α含量，分析其与肝纤维化的关系。

　　1  材料与方法

　　1.1  研究对象  96例慢性乙肝患者均为我院2005年3月至2006年2月住院病人，其中男76例，女20例，年龄18~65岁。诊断均符合2000年西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准。慢性乙肝轻度30例，中度25例，重度25例，乙肝肝硬化16例。正常对照组20例，为我院体检中心健康体检者。

　　1.2  研究方法  所有样本为清晨空腹采血3mL，37℃水浴30min，2 000r/min离心15min，吸取血清置-70℃冻存备检。采用ELISA法测定血清ACTA、TNF-α含量，试剂由美国Genzyme公司提供。采用RIA法测定血清HA水平，试剂盒由北京北方生物技术公司提供。肝组织病理选用美国Temno活检针单操作法取肝组织送病检，肝组织标本采用HE染色。病理分期依据2000年西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》中的关于肝组织纤维化病理分期的诊断标准。

　　1.3  统计学处理  两样本均数比较采用t检验，多个样本均数比较用方差分析。

　　2  结果

　　2.1  各组慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α含量测定结果见表1.血清HA、ACTA、TNF-α含量在慢性乙肝轻度组即明显升高，并随着慢性乙肝的发展而呈逐渐增高趋势，在慢性乙肝重度及肝硬化组达最高水平，各组与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。

　　表1  慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α水平（略）

　　与对照组比较  *P<0.05，**P0.01

　　2.2  肝组织病理纤维化分期与血清HA、ACTA、TNF-α含量关系见表2.血清HA、ACTA、TNF-α含量从S1到S4有不同程度升高，其含量在S4达到最高水平，差异有统计学意义（P<0.01）。

　　表2  肝组织病理分期与HA、ACTA、TNF-α含量的关系（略）

　　与S1期比较  *P<0.01

　　3  讨论

　　肝纤维化的实质是细胞外基质（ECM）在肝内的异常沉积。大量实验研究证实HA是反映肝纤维化程度的可靠指标[2-4].ACT属于转化生长因子-β（TGF-β）超家族，是由两个亚单位（βAβB）组成的二聚体糖蛋白，根据亚单位组成的不同分为ACTA（βAβA）、ACTB（βBβB）、ACTAB（βAβB），其中以ACTA最为重要[5].近年来研究表明，ACTA是肝脏生长抑制性递质，抑制肝细胞生长、诱导其凋亡、刺激肝星状细胞（HSC）分泌ECM、参与肝纤维化形成[6].黄新等[7]实验证实，ACTA能刺激体外培养的HSC分泌ECM，在一定浓度范围内（1~100mg/L）呈剂量依赖性关系。Welt 等[8]研究发现，ACTA通过和其受体结合抑制肝细胞DNA的合成，而其拮抗剂可促进肝细胞再生。TNF-α最早被认为是单核巨噬细胞产生的炎性细胞因子，因与肿瘤患者消瘦密切有关，以前曾被作为恶液质（cachexia）因子， TNF-α通过其胞膜受体TNF-αRⅠ和TNF-αRⅡ发挥其生物学效应。既往大量临床和实验研究表明，肝炎等肝脏疾病患者肝内有大量TNF-α产生并参与肝损伤的病理发生发展，与肝炎和肝硬化及肝癌发生发展密切相关[9].本研究同时比较肝组织在不同肝纤维化分期血清HA、ACTA、TNF-α含量，结果显示：血清HA、ACTA、TNF-α水平随肝组织纤维化程度加重而升高，在S4处于最高水平，说明HA、ACTA、TNF-α水平与肝纤维化程度相关。与多数文献报道相一致[9-11]. 综上所述，慢性乙肝患者血清HA、ACTA、TNF-α肝纤维化的发病机制密切相关，检测患者血清HA、ACTA、TNF-α可以做为反映肝纤维化程度的良好指标。

　　参考文献

　　[1]  程明亮， 杨长青。肝纤维化的基础研究与临床[M].人民卫生出生社，2002，35.

　　[2]  李英， 黄华， 柳利民， 等。 慢性肝炎、肝硬化患者血清透明质酸、IV型胶原、层粘连蛋白检测的临床意义[J].中华医学实践杂志，2005，4（4）：112-114.

　　[3]  燕德起， 张丽， 杨玉然， 等。 肝纤维化指标、生长因子-β1及肝脏CT分型与肝硬化的关系[J].中华现代中西医杂志， 2005，3（11）：186-188.

　　[4]  俞纯山。 肝纤维化的检测及其临床意义[J].中华检验医学杂志， 2000，23（3）：190-192.

　　[5]  Huang X， Li DG， Wang ZR，et al. Expression changes of activin A in the development of hepatic fibrosis， world ［J］ .World JGastroenterol， 2001，7（1）：37-41.

　　[6]  Hughes RD， Evans LW. Activin A and follistatin in acute liver failure［J］。 Eur J Gastroenterol Hepatol， 2003，15（2）：127-131.

　　[7]  黄新，李定国，陆汉明，等。 激活素和卵泡抑素mRNA在肝纤维化形成过程中的作用[J].中华肝脏病杂志， 2002，10（2）：85-89.

　　[8]  Welt C， Sidis Y，Keutmann H，et al.Activins，inhibins，and follistatins： from endocrinology to signaling .A paradigm for the new millennium［J］。Exp Biol Med （Mnywood），2002，227（9）： 724-752.

　　[9]  徐学刚， 张美稀， 董惠芳， 等。 肝病患者血清肿瘤坏死因子-α水平变化[J].世界华人消化杂志， 2003，11（6）：856-858.

　　[10]  Werner S，Alzheimer C.Roles of activin in tissue repair，fibrosis，and inflammatory disease［J］。Cytokine Growth Factor Rev ，2006，17（3）：157-171.

　　[11]  何云，王建宾，王宇明。慢性肝炎肝纤维化程度诊断方法的进展［J］。世界华人消化杂志，2001，9（11）：1305-1309.