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荧光分析法介绍

2016-09-28 17:50 医学教育网
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荧光分析法介绍:

某些物质受紫外光或可见光照射激发后,能发出比激发光波长更长的荧光。利用物质的荧光光谱进行定性、定量分析的方法称为荧光分析法。

基本原理:

物质的分子吸收紫外光或可见光后,由电子基态能级跃迁至激发态能级。处于激发态的分子不稳定,通过各种方式失去能量,返回基态。若分子首先通过碰撞和系统内转换等方式失去部分能量,下降至电子第一激发态的最低振动能级,然后再发射一定波长的光返回电子基态的任一振动能级,则被发射的光称为荧光。显然,荧光的能量小于激发光能量,波长则长于激发光。荧光的平均寿命很短,除去激发光源,荧光立即熄灭。医学教育|网收集整理

记录某一物质溶液在不同波长激发光照射时的发射光强度,可得到该物质的荧光激发光谱;使激发光的波长和强度保持不变,记录荧光物质溶液在不同荧光波长时的发射光强度,就得到了该物质的荧光发射光谱。不同结构的化合物产生不同的荧光激发光谱和荧光发射光谱,据此可对物质进行定性分析。

当激发光的波长、强度,测定用溶剂、温度等条件一定时,物质在低浓度范围内的荧光强度与溶液中该物质的浓度成正比。这就是荧光分析法用于物质定量分析的依据。

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