药品卫生检验方法第一章：

第一章 药品卫生检验通则

一、供试品取样及注意事项

1.供试品取样应有一定数量，以使检验结果具有代表性。因此，正常的供试品，一般每批应随机抽取两瓶或两盒以上的包装单位。检验时，每次最少应分取两瓶（盒）以上的样品共10克或10毫升，中药蜜丸至少应分取4丸以上共10克；贵重或微量包装的供试品，取样量可酌减。

2.凡异常的供试品，则选取有疑问的样品进行检验。

肉眼能看出发霉生虫变质、活螨的样品，应判为不合格，无需再作抽样检验。

3.检查活螨的样品抽样量，见活螨的检验法。

4.供试品在检验前，应严格保持包装的原有状态，不得启开，防止再污染。并放在阴凉干燥处，防止微生物再繁殖，以免影响检验结果。凡已将原包装启开，则无代表性，应另行取样。

5.供试品在检验过程中，从开封至全部检验操作结束，须防止微生物再污染和扩散。凡直接与样品接触的用具，均应事先灭菌并保持无菌；全部操作须在无菌室内进行，或在相应的条件下，按无菌操作规定进行。

6.供试品稀释后，须在1—2小时内操作完毕，防止微生物繁殖或死亡。

7.供试品稀释成供试液后，应在均匀状态下取样。凡因抑菌或不溶于水的剂型，其供试品应作特殊处理后进行检验。

8.从供试品检出大肠杆菌或其它致病菌的报告发出起，该菌种保存一个月备查。如有疑问，可送药检部门或上一级药检单位复核。

二、供试品制备

1.凡固体样品，应称取10克，加在100毫升稀释剂（生理盐水或磷酸盐缓冲液）中，经充分研磨或振摇制成供试液。液体样品，则可量取10毫升加在90毫升稀释剂中，混匀后成供试液。

2.凡含有防腐剂或抑菌成份且影响检验的供试品，可经离心沉淀集菌法及其他适宜的方法处理后，检验大肠杆菌和其他致病菌。集菌处理法如下：取供试液10毫升，以无菌手续放在灭菌的尖底刻度离心管中，经每分钟3500转以上离心沉淀30分钟，用灭菌毛细吸管吸取上清液弃掉，并留下管底的2毫升残余液，将其全部洗净加在培养基中，进行增菌检验。含有不溶性药渣的样品稀释液，可均匀吸取10毫升放在离心管中，先经每分钟500转左右离心沉淀5分钟，取其上清液放在另一灭菌尖底刻度离心管中，再经每分钟约3500转以上离心沉淀30分钟，轻轻吸取上清液弃掉，取其管底的2毫升残余液全部洗净加在培养基中，增菌检验即得。

3.非水溶性的软膏、乳膏、油膏剂等，可称取样品5克，放在乳钵或烧杯中，加8毫升灭菌的吐温—80充分研磨匀后，加入经140°干热灭菌半小时的西黄蓍胶2.5克研磨匀。再加少量45°的稀释剂充分研磨，使呈均匀乳剂。随后边加入稀释剂边研磨，使成100毫升乳剂，移至三角瓶中，即为1∶20供试液。

或称取供试品2.5克，分别量取液体石蜡10毫升，吐温—80.10毫升，稀释剂30毫升。先将供试品置乳钵中，边研磨边滴加液体石蜡；然后再边研磨边滴加吐温—80，研磨均匀后；再边加入稀释剂边研磨，开始每次约1毫升，待起团块时，加入稀释剂3毫升，稍停一分钟，再轻轻研磨至乳化，将稀释剂加完为止，即得1∶20供试液。

4.滤膜法：取规定量的供试品，按1毫升加入灭菌生理盐水50毫升左右，摇匀，用灭菌吸管或注射器注入薄膜过滤器内，减压抽干后，用灭菌生理盐水或其他适宜的溶剂冲洗薄膜3次，每次50毫升。取出薄膜，剪成几条，加至10毫升灭菌稀释剂中，充分摇动，使成供试液。可供细菌、酵母菌和霉菌计数用。或将剪成几条的上述薄膜加至有关的增菌培养基中培养，可供检查绿脓杆菌或金黄色葡萄球菌用。

三、阳性菌株对照试验

1.为便于研究观察成药制剂中，某些含有防腐剂和抑菌成份的干扰作用，以及测试常规检验方法和培养基、试剂等的灵敏度时，可将定量的已知阳性对照菌加在供试品稀释液中，按检验供试品的操作方法进行阳性菌的对照试验。阳性对照菌应生长。

2.常用的阳性对照菌株，卫生部检定所编号：医学教育|网搜集整理大肠杆菌44102、沙门氏菌50094、绿脓杆菌10104、金黄色葡萄球菌26003和破伤风杆菌64067等。

3.对照试验加入的已知活菌量，每批供试品应控制在50—100个范围之内，需氧菌常用的计数方法，如金黄色葡萄球菌可用37℃培养18—20小时－6新鲜肉汤培养物，十倍递增稀释至10 ，取其0.1－7毫升按琼脂平板表面涂抹法或取10 稀释液1毫升按浇碟法进行活菌数测定。按每毫升菌液内所含的活菌量，取适量加在供试品里，对照检验即得。破伤风杆菌的阳性对照以作毒力试验为主（具体操作见破伤风杆菌检验项下。）

4.作阳性菌株对照试验时，应注意安全，严格防止对照菌污染供试品和环境。为此，加入阳性菌的操作可在另外无菌室或其他适宜的地方进行。